黄瓜花叶病毒(CMV)是能侵染多种植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生长并造成减产。研究人员通过农杆菌介导将该病毒外壳蛋白的cDNA导入番茄植株中,成功获得抗CMV的番茄植株。
(1)获得CMV的RNA后,在逆转录逆转录的催化下才能合成CMV外壳蛋白的cDNA。
(2)获得cDNA后,需先通过一定方法将其插入到农杆菌的T-DNAT-DNA片段中,然后将番茄子叶切段与该农杆菌共同培养,以实现对番茄细胞的转化。
(3)将经共同培养后的番茄外植体接种于含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上培养一段时间,只有部分外植体生出愈伤组织。研究人员据此确定这些生出愈伤组织的外植体都已成功导入了cDNA,你认为他们做出以上判断的理由是重组表达载体同时含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功导入了重组质粒的外植体才能在含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上生出愈伤组织 再分化重组表达载体同时含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功导入了重组质粒的外植体才能在含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上生出愈伤组织 再分化。
(4)要想确定转基因番茄已经成功表达出CMV外壳蛋白,需要进行抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交实验。
(5)若要验证转基因番茄具有较好的抗CMV能力,请写出实验设计思路用强致病力的CMV分别感染转基因番茄与未转基因的番茄,通过对照发现转基因番茄具有较好的抗CMV能力用强致病力的CMV分别感染转基因番茄与未转基因的番茄,通过对照发现转基因番茄具有较好的抗CMV能力。
转基因番茄自交,子代中抗性植株与敏感植株数量之比接近3:1,由此可以得出的结论是目的基因已经整合到受体细胞的染色体上目的基因已经整合到受体细胞的染色体上、获得的转基因亲本为杂合子获得的转基因亲本为杂合子(答出两点)。
【答案】逆转录;T-DNA;重组表达载体同时含有卡那霉素抗性基因和青霉素抗性基因,只有成功导入了重组质粒的外植体才能在含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上生出愈伤组织 再分化;抗原-抗体杂交;用强致病力的CMV分别感染转基因番茄与未转基因的番茄,通过对照发现转基因番茄具有较好的抗CMV能力;目的基因已经整合到受体细胞的染色体上;获得的转基因亲本为杂合子
【解答】
【点评】
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