如图所示为A、B、C三种质粒和一个含目的基因D的DNA片段示意图。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoRⅠ、PvuⅠ为两种限制酶，质粒上限制酶括号内的数字表示限制酶切割位点与复制原点的距离。请回答：
（1）据图分析质粒A、C一般不能作为运载体的理由分别是（质粒A）缺少标记基因、（质粒C）复制原点会被限制酶切割（质粒A）缺少标记基因、（质粒C）复制原点会被限制酶切割。若要获取目的基因，应该选用PvuIPvuI酶切割。
（2）将图中的目的基因与质粒B进行重组。在基因工程的操作过程中，需要检查目的基因是否重组到质粒中，应使用EcoRIEcoRI酶切重组质粒，完全酶切后，进行电泳检测。若电泳图谱中出现长度为1.1kb和5.6kb,或者3.13.1kb和3.63.6kb的片段，则可判断该重组质粒已与目的基因重组成功（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计）。
（3）若选择自身不含lacZ基因并对抗生素敏感的大肠杆菌作为受体细胞，则如何筛选成功导入重组质粒的受体细胞？在含有氨苄青霉素的培养基上培养经过导入处理的大肠杆菌，若能形成白色菌落的即为导入重组质粒的大肠杆菌在含有氨苄青霉素的培养基上培养经过导入处理的大肠杆菌，若能形成白色菌落的即为导入重组质粒的大肠杆菌。目的基因能在大肠杆菌细胞内表达出相同的蛋白质，其遗传学基础是自然界的生物共用一套密码子自然界的生物共用一套密码子。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】（质粒A）缺少标记基因、（质粒C）复制原点会被限制酶切割；PvuI；EcoRI；3.1；3.6；在含有氨苄青霉素的培养基上培养经过导入处理的大肠杆菌，若能形成白色菌落的即为导入重组质粒的大肠杆菌；自然界的生物共用一套密码子
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：28引用：4难度：0.6
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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