基因测序技术在临床和科研中发挥着越来越重要的作用，该技术通常包括核酸提取、核酸扩增、产物检测3个步骤。
（1）已知SDS（十二烷基硫酸钠）可以使蛋白质变性，在利用真核生物做材料进行DNA粗提取时，通常在研磨液中加入SDS的目的是

使蛋白质变性，与DNA分离

使蛋白质变性，与DNA分离

。DNA粗提取过程中常用到体积分数为95%的冷酒精，其作用是

分离DNA和蛋白质

分离DNA和蛋白质

。
（2）测序技术通常需要用PCR技术扩增待测分子。如表是某研究小组设计的两组引物，其中不合理的是

B

B

，原因是

引物太短、特异性弱；两个引物会互补结合

引物太短、特异性弱；两个引物会互补结合

。

引物	序列
A	5′-GCCCTCTACTCCCCGGTCTTG-3′ 5′-GCCCATCTGCAAGTTATCCTA-3′
B	5′-GGGATT-3′ 5′-AATCCC-3

（3）第一代测序技术又叫双脱氧链终止法，它以DNA合成反应为基础。如图是该技术的测序原理和某待测DNA序列的电泳图谱。在反应体系中加入dNTP（2′，3′-双脱氧核苷三磷酸）的作用是

dNTP的3'端不能形成磷酸二酯键导致复制停止，形成长短不一的DNA片段

dNTP的3'端不能形成磷酸二酯键导致复制停止，形成长短不一的DNA片段

。据图分析，待测DNA片段的碱基序列是3′

-GACTGCCA-或-TGGCAGTC-

-GACTGCCA-或-TGGCAGTC-

5′。

（4）第二代测序又称为高通量测序。二代测序在DNA复制过程中通过捕捉新添加的碱基所携带的特殊标记（一般为荧光分子标记）来确定DNA的序列。这就要求在测序时，DNA分子必须同步复制，来增强荧光信号强度从而读出DNA序列。据此分析，二代测序技术不适合测量较

长

长

（填“长”或“短”）的DNA序列，原因是

DNA分子越长，基因复制的同步性降低，导致碱基测序质量下降

DNA分子越长，基因复制的同步性降低，导致碱基测序质量下降

。