科研工作者将径柳匙叶草液泡膜 Na+/K+逆向转运蛋白基因（TaNHX2 基因）转移到棉花细胞内，获得了耐盐新品种。图1是含有目的基因的 DNA 片段，Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ为三种限制酶（Sau3AⅠ、BamHⅠ切割形成的粘性末端相同）；图2是农杆菌 Ti 质粒结构示意图。请分析回答问题：
（1）将径柳匙叶草不同基因的DNA片段导入受体菌的群体中储存，再根据目的基因的特定序列从受体菌中提取该基因，这种获取目的基因的方法称为 从基因文库中获取目的基因从基因文库中获取目的基因。
（2）计划用 EcoRⅠ分别切割图1中DNA片段和图2所示质粒，以构建基因表达载体。
①构建表达载体需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶限制酶、DNA连接酶；
②本方案的缺陷是：可能导致 目的基因和质粒的自我环化目的基因和质粒的自我环化以及目的基因与质粒的反向连接。
③为避免上述缺陷，最佳方案是用 EcoRI、BamHIEcoRI、BamHI切割图1的DNA，用 EcoRI、Sau3AIEcoRI、Sau3AI切割图2质粒。
（3）目的基因成功导入受体细胞后，还需要利用 植物组织培养植物组织培养技术才能得到转基因棉花苗，这一技术的原理是 细胞的全能性细胞的全能性。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】从基因文库中获取目的基因；限制酶、DNA连接酶；目的基因和质粒的自我环化；EcoRI、BamHI；EcoRI、Sau3AI；植物组织培养；细胞的全能性
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：8引用：1难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
