北极比目鱼中有抗冻基因，下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，请回答：
（1）利用过程①的方法构建的基因文库是 部分基因文库（cDNA文库）部分基因文库（cDNA文库），除了从基因文库中获取目的基因以外，常用的获取目的基因的方法还有 利用PCR技术扩增利用PCR技术扩增和 人工合成人工合成。
（2）过程②中常需要使用限制酶和DNA连接酶，既能连接黏性末端又能连接平末端的DNA连接酶是 T4DNA连接酶T4DNA连接酶。
（3）此题中将目的基因导入受体细胞的方法是 农杆菌转化法农杆菌转化法。
（4）为使过程①获取的目的基因在番茄细胞中能够表达，在构建表达载体时，需要将目的基因插入 Ti质粒的T-DNATi质粒的T-DNA，并且需在目的基因的首端和尾端分别加入 启动子启动子，终止子终止子。
（5）要检测番茄的DNA上是否插入抗冻基因，应以 用放射性同位素标记的目的基因用放射性同位素标记的目的基因为探针，与番茄基因组DNA杂交；要确认抗冻基因是否在转基因番茄植株中正确表达，应通过 抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交法检测转基因番茄植株中该基因的表达产物是否呈阳性。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】部分基因文库（cDNA文库）；利用PCR技术扩增；人工合成；T4DNA连接酶；农杆菌转化法；Ti质粒的T-DNA；启动子；终止子；用放射性同位素标记的目的基因；抗原-抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：0引用：1难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
