如图是转基因抗盐马铃薯的培育过程，请分析回答问题：
（1）为获取抗盐基因，可以从碱蓬细胞研磨液中提取抗盐基因的mRNAmRNA来合成cDNA。利用PCR技术可在体外获得大量抗盐基因，该技术需要有一段已知抗盐基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物引物；在采用常规PCR扩增目的基因过程中、使用的DNA聚合酶不同一般生物体内聚合酶，其最主要特点是耐高温耐高温。
（2）构建基因表达载体时，为了防止含目的基因的外源DNA片段和质粒自身环化，最好选用图中限制酶
EcoRIEcoRI和HindIIIHindIII对它们进行切割，不能使用SmaI切割的原因是SmaI会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因SmaI会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因。
（3）构建重组质粒时，还要在抗盐基因前面加上启动子启动子。构建因表达载体时，应将目的基因插入到农杆菌粒Ti质粒的T-DNAT-DNA上，其原因是T-DNA是可以转移的DNAT-DNA是可以转移的DNA。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】mRNA；引物；耐高温；EcoRI；HindIII；SmaI会破坏质粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因；启动子；T-DNA；T-DNA是可以转移的DNA
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：19引用：1难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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