草甘膦是一种非选择性除草剂,杀死杂草的同时也杀死农作物。它与植物体内的PEP(磷酸烯醇式丙酮酸)结构相似,可与PEP竞争结合EPSP合酶,阻止PEP转化,影响植物细胞正常代谢而导致植物死亡。我国科学家从草甘膦施用土壤中的微生物体内获取草甘膦抗性基因GR29,并将其导入大豆体细胞中获得转基因抗草甘膦大豆,如图所示。回答下列问题:

(1)图中的GR29基因称为 目的基因目的基因,通过PCR技术可在总DNA中专一性的扩增出GR29基因,原因是 PCR过程中使用的引物能与GR29基因的cDNA特异性结合PCR过程中使用的引物能与GR29基因的cDNA特异性结合。
(2)图中将GR29基因插入到Ti质粒的T-DNA上,原因是农杆菌能将Ti质粒上的T-DNA分子转移到宿主细胞并整合到宿主细胞的 染色体DNA染色体DNA上。构建的重组Ti质粒中除图示元件外,还必须具有启动子和终止子,其中启动子的作用是 启动子是RNA聚合酶识别与结合的部位,它能驱动目的基因转录出mRNA启动子是RNA聚合酶识别与结合的部位,它能驱动目的基因转录出mRNA。
(3)图中的两次筛选中,其中“筛选1”中,需在农杆菌的培养基中添加 四环素四环素,才能筛选出含重组Ti质粒的农杆菌。在“筛选2”中,为检测GR29基因能否翻译出相应蛋白可采用的方法是 抗原—抗体杂交技术抗原—抗体杂交技术。
(4)为获得草甘膦抗性更强的转基因大豆,请尝试对上述转基因大豆培育过程进行改进,写出你的改进措施:用添加草甘膦的培养基进行筛选,并可逐步增加浓度用添加草甘膦的培养基进行筛选,并可逐步增加浓度。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】目的基因;PCR过程中使用的引物能与GR29基因的cDNA特异性结合;染色体DNA;启动子是RNA聚合酶识别与结合的部位,它能驱动目的基因转录出mRNA;四环素;抗原—抗体杂交技术;用添加草甘膦的培养基进行筛选,并可逐步增加浓度
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:3引用:1难度:0.7
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