镰孢菌引起的小麦赤霉病被称为小麦“游症”，是威胁粮食安全的重大国际性难题。我国科学家从小麦近缘属植物长穗偃麦草中首次克隆出主效抗赤霉病基因Fhb7（编码一种谷胱甘肽S-转移酶），为解决小麦赤霉病的世界性难题提供了“金钥匙”。研究发现，用光诱导型启动子（PrbcS）能够使Fhb7基因表达，其结合T基因后能使Fhb7基因更高水平表达。
（1）PrbcS是一段有特殊结构的DNA片段，能被 RNA聚合酶RNA聚合酶识别并结合，驱动基因的持续 转录转录。
（2）通过PCR技术扩增Fhb7基因片段，反应过程一般由95℃热变性、55～60℃引物和模板配对、72℃延伸三个步骤，经过多次循环完成。延伸阶段选用72℃综合考虑了两个因素，这两个因素是 防止DNA变性防止DNA变性和 保持Taq酶活性所需温度条件保持Taq酶活性所需温度条件，若研究人员在反应缓冲溶液中加入4种dNTP时，误加入了单一种类的ddNTP（即2、3双脱氧核苷三磷酸，在脱氧核糖的3位置缺少一个羧基），则子链会停止延伸，分析其原因是 3号碳上不是羟基，不能与下一个脱氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯键3号碳上不是羟基，不能与下一个脱氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯键。
（3）如图中甲、乙均为Fhb7基因表达载体构建过程中的中间载体，请分析重组载体的部分构建过程。
（注：Kmr为卡那霉素抗性基因，origin为复制原点，其余为限制酶酶切位点）
区别含有中间载体甲-PrbcS-*T与含有重组载体乙-PrbcS-*T的微生物的方法是 用含有卡那霉素的培养基培养用含有卡那霉素的培养基培养。经酶切后凝胶电泳，测得2B片段为0.3kb,经图示信息分析，PrbcS-T的长度约为 1.8kb1.8kb。据图分析，形成重组载体乙-PrbcS-*T，需要使用限制酶 EcoRⅠEcoRⅠ切割，图中重组载体乙-PrbcS-*T问号处有 EcoRⅠSphⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、NotⅠ、XhoⅠ、EcoRⅤEcoRⅠSphⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、NotⅠ、XhoⅠ、EcoRⅤ种限制酶的酶切位点。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】RNA聚合酶；转录；防止DNA变性；保持Taq酶活性所需温度条件；3号碳上不是羟基，不能与下一个脱氧核苷酸的磷酸形成磷酸二酯键；用含有卡那霉素的培养基培养；1.8kb；EcoRⅠ；EcoRⅠSphⅠ、BamHⅠ、EcoRⅠ、NotⅠ、XhoⅠ、EcoRⅤ
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：16引用：2难度：0.5
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1．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
2．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：4引用：3难度：0.7
