某一质粒载体如图所示,外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后,与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连续反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌。结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因,含有质粒载体,含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题:
(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有 能自我复制、具有标记基因能自我复制、具有标记基因(答出两点即可)。而作为基因表达载体,除满足上述基本条件外,还需具有 启动子启动子和 终止子终止子。
(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含有环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是 二者均不含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均不生长二者均不含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均不生长;并且载体和重组质粒的细胞也是不能区分的,其原因是 二者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长二者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用含有 四环素四环素的固体培养基。
【考点】基因进入受体细胞的载体;基因表达载体的构建.
【答案】能自我复制、具有标记基因;启动子;终止子;二者均不含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均不生长;二者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长;四环素
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:67引用:1难度:0.7