利用转基因植物研制、生产疫苗,不但可以改变传统的疫苗生产方式和接种手段,而且会大大降低疫苗的生产成本。以胡萝卜无菌幼苗的子叶和下胚轴为外植体,通过携带有35S启动子驱动的肺结核杆菌分泌蛋白MPT64基因的根癌土壤杆菌LBA4404的介导,将肺结核杆菌MPT64基因成功导入胡萝卜细胞,获得能表达肺结核疫苗(MPT64蛋白)的转基因胡萝卜。回答下列问题:
(1)从免疫学的角度分析,结核杆菌MPT64蛋白属于 抗原抗原;从基因工程技术看,肺结核杆菌MPT64基因属于 目的基因目的基因。
(2)为获取MPT64基因,可从肺结核杆菌的细胞中提取对应mRNA,在 逆转录逆转录酶的作用下合成双链cDNA片段,再用 DNA连接DNA连接酶将35S启动子拼接到cDNA片段的首端,能保证MPT64基因在胡萝卜细胞的细胞核中能高效 转录转录。
(3)通常采用PCR技术扩增MPT64基因,扩增过程要在 PCR仪PCR仪(仪器)中进行,鉴定PCR产物常采用的方法是 琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳;设计引物是PCR技术关键步骤之一,如图为设计的两种引物与MPT64基因的两条链结合部位示意图,箭头表示子链的延伸方向是从 子链的5'端往3'端(或5'→3')子链的5'端往3'端(或5'→3')延伸。

(4)转基因胡萝卜细胞经过 脱分化脱分化过程形成愈伤组织;愈伤组织能再分化成芽和根等,培养基中生长素和细胞分裂素的 浓度、用量的比例浓度、用量的比例可影响愈伤组织的形成和分化。
【答案】抗原;目的基因;逆转录;DNA连接;转录;PCR仪;琼脂糖凝胶电泳;子链的5'端往3'端(或5'→3');脱分化;浓度、用量的比例
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:4引用:1难度:0.7
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