人类的P53基因(抑癌基因)位于17号染色体上,细胞静止时,P53基因表达的P53蛋白量很低,但在进行增殖的细胞中,P53蛋白量可升高5~100倍。大象含有多对P53基因,推测这是其很少患癌的主要原因。为研究人P53基因在乳腺癌细胞中的作用,某科研小组构建了如图所示的基因表达载体。回答下列问题:
(1)基因工程中所使用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获取。基因文库包括 cDNA文库(部分基因文库)cDNA文库(部分基因文库)和 基因组文库基因组文库。用PCR技术扩增P53基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最显著的特点是 耐高温(或热稳定性高)耐高温(或热稳定性高)。
(2)构建的基因表达载体中,除了图中标明的DNA片段外,箭头处的片段是 启动子启动子其具有的功能是 RNA聚合酶识别和结合的位点,能驱动目的基因转录RNA聚合酶识别和结合的位点,能驱动目的基因转录,标记基因能将含有P53基因的受体细胞筛选出来,标记基因一般是 抗生素抗性基因(或荧光蛋白基因)抗生素抗性基因(或荧光蛋白基因)。
(3)在培养瓶中培养乳腺癌细胞时,由于癌细胞增殖不会出现 接触抑制接触抑制现象,因此不需要用胰蛋白酶处理。为检测乳腺癌细胞是否表达出P53蛋白,可采用的方法是 抗原-抗体杂交(或检测乳腺癌细胞中的P53蛋白量)抗原-抗体杂交(或检测乳腺癌细胞中的P53蛋白量)。
【考点】动物细胞培养的条件与过程.
【答案】cDNA文库(部分基因文库);基因组文库;耐高温(或热稳定性高);启动子;RNA聚合酶识别和结合的位点,能驱动目的基因转录;抗生素抗性基因(或荧光蛋白基因);接触抑制;抗原-抗体杂交(或检测乳腺癌细胞中的P53蛋白量)
【解答】
【点评】
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