苯酚是重要的化工原料,被广泛应用于酚醛树脂、炼油、焦炭、染料等的生产中,并成为这些工业废水中的主要污染物。水溶液中的苯酚可被皮肤吸收而引起中毒,含酚废水可使水中生物大量死亡。活性污泥中的微生物作为废水处理的主体,是有毒物质分解转化的主要执行者。回答下列问题:
(1)欲选出高效分解苯酚的菌株,应从 活性污泥活性污泥中取样,接着在 液体液体(填固体或液体)培养基中选择培养,以增大高效分解苯酚菌的浓度。对培养基进行灭菌处理时,应采用 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌法。
(2)某同学采用稀释涂布平板法对高效分解苯酚的菌株进行计数,其原理是 当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。
(3)在3个细菌培养基平板上,均接种稀释倍数为103的稀释液0.1mL,培养一段时间后,平板上长出的菌落数分别为:108、114和120,因此可得出1mL初始菌液中的活菌数为 1.14×1061.14×106个。使用血细胞计数板计数时,为了区分活菌和死菌可采用台盼蓝染色,对活菌计数时应选择视野中 不着色不着色的细胞进行计数。
(4)分解苯酚的关键酶是苯酚羟化酶。苯酚羟化酶经分离纯化,可用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定,该方法可使电泳迁移率完全取决于 分子的大小分子的大小。生产上常常把苯酚羟化酶固定化后使用,研究发现不能用同一种技术来固定化苯酚羟化酶和其它所有酶,可能的原因是 不同酶的分子结构不同;不同酶理化性质不同不同酶的分子结构不同;不同酶理化性质不同(答出两点即可)。
【考点】微生物的选择培养和计数;微生物的数量测定.
【答案】活性污泥;液体;高压蒸汽灭菌;当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌;1.14×106;不着色;分子的大小;不同酶的分子结构不同;不同酶理化性质不同
【解答】
【点评】
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