科研人员利用农杆菌转化法将大麦黄矮病毒的复制酶基因（R基因）导入小麦植株，培育出抗病毒植株。实验流程如图，回答下列问题。
（1）RT-PCR技术是RNA链被逆转录为互补DNA后，再以此为模板通过PCR进行扩增。RT-PCR反应体系中加入的原料是 4种脱氧核苷酸4种脱氧核苷酸。在设计一对引物时，科研人员在引物序列中增加了与质粒上相同的某限制酶的识别序列，其目的是 用该限制酶同时处理目的基因序列和质粒，使两者产生相同的黏性末端用该限制酶同时处理目的基因序列和质粒，使两者产生相同的黏性末端，便于构建基因表达载体。
（2）构建基因表达载体时，只采用一种限制酶既会产生R基因与质粒之间正向连接也会产生反向连接。科研人员选取反向连接的基因表达载体进行后续实验，能取得良好的抗病毒效果，从基因表达的过程分析，其原因可能是反向插入的目的基因转录产生的RNA与病毒RNA互补配对，抑制病毒RNA的生理功能反向插入的目的基因转录产生的RNA与病毒RNA互补配对，抑制病毒RNA的生理功能。
（3）图中①过程是 再分化再分化，此过程中关键激素生长素和 细胞分裂素细胞分裂素的浓度、比例会影响愈伤组织的发育方向。
（4）图中②过程在分子水平检测幼苗是否含有目的基因时，需要提取幼苗的DNA并进行后续检测。提取过程中为了将DNA与蛋白质初步分离，使用酒精的原理是 DNA不溶于酒精而某些蛋白质溶于酒精DNA不溶于酒精而某些蛋白质溶于酒精。进行个体水平的鉴定时，简要的操作是 在转基因幼苗上接种大麦黄矮病毒，一段时间后观察转基因幼苗的生理状况在转基因幼苗上接种大麦黄矮病毒，一段时间后观察转基因幼苗的生理状况。
【考点】基因工程的操作过程综合；植物的组织培养．
【答案】4种脱氧核苷酸；用该限制酶同时处理目的基因序列和质粒，使两者产生相同的黏性末端；反向插入的目的基因转录产生的RNA与病毒RNA互补配对，抑制病毒RNA的生理功能；再分化；细胞分裂素；DNA不溶于酒精而某些蛋白质溶于酒精；在转基因幼苗上接种大麦黄矮病毒，一段时间后观察转基因幼苗的生理状况
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：7引用：1难度：0.6
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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