许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ基因，其编码的产物β-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从受体细胞中筛选出导入重组质粒的细胞，过程如图所示。请据图回答：
（1）基因工程中，基因表达载体的组成包括复制原点、启动子、终止子、标记基因标记基因、目的基因目的基因。
（2）限制酶EcoRI的识别序列和切割位点-G↓AATTC-，SmaⅠ的识别序列和切割位点-CCC↓GGG-，图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是 -TTAA-TTAA，连接过程中需要的基本工具是 DNA连接酶DNA连接酶。
（3）转化过程中，大肠杆菌应先用Ca2+处理，使其处于能吸收周围 DNADNA的状态。
（4）菌落颜色为白色的是 菌落③菌落③，原因是 lacZ标记基因区插入外源基因后被破坏，不能表达出β-半乳糖苷酶lacZ标记基因区插入外源基因后被破坏，不能表达出β-半乳糖苷酶。
（5）检测菌落③中的目的基因是否表达，可采用的方法是 抗原一抗体杂交抗原一抗体杂交。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】标记基因；目的基因；-TTAA；DNA连接酶；DNA；菌落③；lacZ标记基因区插入外源基因后被破坏，不能表达出β-半乳糖苷酶；抗原一抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：14引用：1难度：0.7
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（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
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（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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