寨卡病毒(ZIKV)是一种可通过蚊虫叮咬等途径传播的单股正链RNA病毒,该病毒编码的NS2B蛋白在病毒复制、组装及致病过程中具有重要作用。通过基因工程技术构建携带NS2B基因的重组原核表达质粒,采用大肠杆菌作为表达菌株,通过诱导表达、纯化获得NS2B目的蛋白。用纯化后的NS2B蛋白通过如图示过程制备抗NS2B蛋白的单克隆抗体,图中X、Y表示相关细胞。请回答下列相关问题:

(1)通过基因工程技术构建可表达NS2B蛋白大肠杆菌菌株,该操作技术的核心是 基因(NS2B蛋白合成基因)表达载体的构建基因(NS2B蛋白合成基因)表达载体的构建。首先需获得NS2B蛋白合成基因,其途径为:提取ZIKV的RNA,通过 逆转录(反转录)逆转录(反转录)过程获取相应的DNA,再利用 限制性核酸内切酶(限制酶)限制性核酸内切酶(限制酶)选择性切割DNA获得NS2B蛋白合成基因。
(2)若要对NS2B蛋白合成基因进行扩增,常用技术的原理及该技术使用的酶依次是 DNA双链复制DNA双链复制、Taq酶(或热稳定DNA聚合酶)Taq酶(或热稳定DNA聚合酶)。
(3)图中对X进行筛选需要做 专一抗体(阳性)专一抗体(阳性)检测,通过筛选获得的细胞Y具有的特点是 既能无限增殖,又能产生特异性抗体既能无限增殖,又能产生特异性抗体,单克隆抗体最广泛的应用是 用作体外诊断试剂用作体外诊断试剂。
【考点】DNA的粗提取与鉴定;单克隆抗体及其应用.
【答案】基因(NS2B蛋白合成基因)表达载体的构建;逆转录(反转录);限制性核酸内切酶(限制酶);DNA双链复制;Taq酶(或热稳定DNA聚合酶);专一抗体(阳性);既能无限增殖,又能产生特异性抗体;用作体外诊断试剂
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:27引用:4难度:0.5