1965年中国科学家人工合成了具有生物活性的结晶牛胰岛素,摘取了人工合成蛋白质的桂冠。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素的两种方法:AB法是根据胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段,利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素;BCA法是利用胰岛B细胞中的mRNA得到胰岛素基因,导入工程菌获得胰岛素。这两种方法使用同一种质粒作为载体。
(1)AB法中人工合成的两种DNA片段均有多种可能的序列的原因是 一种氨基酸可能对应多种密码子一种氨基酸可能对应多种密码子。用 AB和BCAAB和BCA(填“AB”、“BCA”或“AB和BCA”)法获取的目的基因中不含人胰岛素基因启动子。

(2)图中是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。为使目的基因与载体正确连接,在设计PCR引物时可添加限制酶 XhoⅠ和MunⅠXhoⅠ和MunⅠ的识别序列。通过上述方法获得人的胰岛素基因后,需要通过PCR技术进行扩增,已知胰岛素基因左端①处的碱基序列为-TTTAAAGGG-,则其中一种引物设计的序列是5'-CTCGAGTTTAAAGGGCTCGAGTTTAAAGGG-3'。
(3)β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色。据此并结合图中信息简述将目的基因导入大肠杆菌,并筛选工程菌的过程 经钙离子处理的大肠杆菌与重组质粒混合培养一段时间后,再将大肠杆菌接种到添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基上筛选出白色的菌落即为工程菌经钙离子处理的大肠杆菌与重组质粒混合培养一段时间后,再将大肠杆菌接种到添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基上筛选出白色的菌落即为工程菌。
(4)科学家利用蛋白质工程技术,研制出了赖脯胰岛素,与天然胰岛素相比,其皮下注射后易吸收、起效快。写出获取赖脯胰岛素基因的流程:从 从预期的蛋白质功能出发从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列推测应有的氨基酸序列→找到相对于的脱氧核苷酸序列→获得所需要的蛋白质。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】一种氨基酸可能对应多种密码子;AB和BCA;XhoⅠ和MunⅠ;CTCGAGTTTAAAGGG;经钙离子处理的大肠杆菌与重组质粒混合培养一段时间后,再将大肠杆菌接种到添加了氨苄青霉素和X-gal的培养基上筛选出白色的菌落即为工程菌;从预期的蛋白质功能出发;推测应有的氨基酸序列
【解答】
【点评】
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