营养缺陷型菌株是指野生型菌株经过人工诱变或自然突变失去合成某种营养的能力,只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子后才能生长的菌株,包括氨基酸缺陷型菌株、维生素缺陷型菌株和碱基缺陷型菌株等。筛选营养缺陷型菌株的常规步骤为诱变育种→淘汰野生型→检出缺陷型→鉴定缺陷型。用紫外线诱变大肠杆菌获得营养缺陷型菌株,诱变后常采用含青霉素的培养基淘汰野生型大肠杆菌,使缺陷型大肠杆菌得以富集。
(1)限量培养法可用于营养缺陷型菌株的检出,其原理是野生型菌株在限量培养基上获取营养物质的能力强于营养缺陷型菌株,如图甲所示,其中菌落 BB(填:“A”或“B”)即为检出的营养缺陷型大肠杆菌菌株。该方法中还需将一个未接种的平板同时放在恒温培养箱中培养,其目的是 作为空白对照,判断培养基本身是否被杂菌污染作为空白对照,判断培养基本身是否被杂菌污染。

(2)研究小组一利用生长图谱法初步确定检出的营养缺陷型大肠杆菌的类型,即在基本培养基乙的A~E这5个区域中分别添加不同的营养物质,然后用 稀释涂布平板稀释涂布平板法将检出的营养缺陷型大肠杆菌接种在乙上,若培养一段时间后在乙的BC交界处长出了菌落,则说明该菌株是 氨基酸和维生素氨基酸和维生素营养缺陷型菌。
(3)研究小组二用上述方法鉴定了某菌株属于维生素营养缺陷型,为了进一步确定该菌株的具体类型,他们把15种维生素按照不同组合分为5个小组,用5个滤纸片分别蘸取不同小组的维生素,然后覆于接种后的琼脂平板上培养一段时间。
组别 | 维生素组合 | ||||
1 | 维生素A | 维生素B1 | 维生素B2 | 维生素B6 | 维生素B12 |
2 | 维生素C | 维生素B1 | 维生素D2 | 维生素E | 烟酰胺 |
3 | 叶酸 | 维生素B2 | 维生素D2 | 胆碱 | 泛酸钙 |
4 | 对氨基苯甲酸 | 维生素B6 | 维生素E | 胆碱 | 肌醇 |
5 | 生物素 | 维生素12 | 烟酰胺 | 泛酸钙 | 肌醇 |
维生素B1
维生素B1
;若菌株为叶酸和生物素的双营养缺陷型大肠杆菌,则其在丙培养基上形成菌落的位置是 3与5的交界处
3与5的交界处
。【答案】B;作为空白对照,判断培养基本身是否被杂菌污染;稀释涂布平板;氨基酸和维生素;维生素B1;3与5的交界处
【解答】
【点评】
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