白细胞介素是人体重要的淋巴因子,具有免疫调节、抑制肿瘤等多种功能。近年来科学家将药用蛋白转向植物生产,如图是将人的白细胞介素基因导入马铃薯中,培养生产白细胞介素的过程。(tsr为一种抗生素-硫链丝菌素的抗性基因)

(1)提取人的白细胞介素基因适宜选用的限制酶是PstⅠ和HindⅢPstⅠ和HindⅢ,不能使用限制酶SmaⅠ的原因是限制酶SmaⅠ酶切位点位于白细胞介素基因中部,使用它会造成目的基因断裂限制酶SmaⅠ酶切位点位于白细胞介素基因中部,使用它会造成目的基因断裂。
(2)除图示方法外,也可从利用反转录反转录法构建的cDNA文库中获取目的基因。获得目的基因后可采用PCR技术大量扩增,需提供Taq酶和引物引物等。
(3)将目的基因导入马铃薯细胞常采用农杆菌转化农杆菌转化法,其原理是将目的基因导入Ti质粒上的T-DNAT-DNA。
(4)为筛选出含目的基因的马铃薯细胞,需要在培养基中添加硫链丝菌素硫链丝菌素。最终为了检测目的基因是否在马铃薯中表达,可通过抗原-抗体杂交抗原-抗体杂交方法进行分子水平的检测。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】PstⅠ和HindⅢ;限制酶SmaⅠ酶切位点位于白细胞介素基因中部,使用它会造成目的基因断裂;反转录;引物;农杆菌转化;T-DNA;硫链丝菌素;抗原-抗体杂交
【解答】
【点评】
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