报告基因是指一类易于检测且实验材料本身不具备的基因。阿尔茨海默病（AD）是由淀粉样前体蛋白（APP）过量表达导致的神经系统退变性疾病，用增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因作为报告基因，将EGFP基因与 APP 基因融合，可方便、经济、快速地筛选出促进人 APP mRNA降解的药物。研究表明，EGFP与APP 基因融合后，虽能全部转录但仅有 ECFP蛋白得到表达。EGFP基因与 APP 基因融合过程如图所示。
（1）APP751、EGFP基因的cDNA 是以其mRNA 为模板经 逆转录逆转录过程形成的，将其储存于细菌质粒中，属于构建 基因文库（部分基因文库或cDNA文库）基因文库（部分基因文库或cDNA文库）。
（2）据图分析，Klenow 酶的作用是 将XhaⅠ切割获得的黏性末端催化产生平末端将XhaⅠ切割获得的黏性末端催化产生平末端。切割 peDNA3.1质粒获得APP751基因时，研究人员没有选择直接用HindⅢ、XbaⅠ同时切割，而是历经①→②→③的复杂过程，原因是 直接用HindⅢ、XhaⅠ同时切割、产物两端都是黏性末端、而经过①→②→③可使目的基因两端分别为平末端和黏性末端，才能与被SmaⅠ与HindⅢ打开的载体连接直接用HindⅢ、XhaⅠ同时切割、产物两端都是黏性末端、而经过①→②→③可使目的基因两端分别为平末端和黏性末端，才能与被SmaⅠ与HindⅢ打开的载体连接。
（3）COS-7是来源于非洲绿猴肾成纤维细胞，培养这类细胞时，为保证细胞生长和避免污染，应分别在合成培养基中添加 血浆、血清和抗生素血浆、血清和抗生素，传代培养不宜超过 10 代，原因是 细胞在传至10代后，增减减缓乃至停止，部分细胞的细胞核型可能发生变化细胞在传至10代后，增减减缓乃至停止，部分细胞的细胞核型可能发生变化。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】逆转录；基因文库（部分基因文库或cDNA文库）；将XhaⅠ切割获得的黏性末端催化产生平末端；直接用HindⅢ、XhaⅠ同时切割、产物两端都是黏性末端、而经过①→②→③可使目的基因两端分别为平末端和黏性末端，才能与被SmaⅠ与HindⅢ打开的载体连接；血浆、血清和抗生素；细胞在传至10代后，增减减缓乃至停止，部分细胞的细胞核型可能发生变化
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：33引用：2难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
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