番茄是重要的蔬菜和水果，CMV 病毒常使番茄生产遭受重大损失，由于传统育种在番茄抗病毒病方面往往难以奏效，所以人们开展了大量番茄抗病毒病的基因工程研究，如图1图2表示含抗 CMV基因的 DNA片段和质粒，请回答下列问题。
（1）若要用 PCR 技术特异性地拷贝“抗 CMV 基因“，该过程遵循的原则是碱基互补配对原则碱基互补配对原则，需要加入的原料是 dATP、dTTP、dCTPdCTP和 dGTP，酶是耐高温的DNA聚合酶耐高温的DNA聚合酶，一个目的基因经过 3次循环需要消耗引物1414个。
（2）据图1分析构建所需要的基因表达载体需要选用限制酶Ⅰ和ⅡⅠ和Ⅱ分别对目的基因和质粒进行切割，原因是用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割不仅能够使目的基因插入到T-DNA片段中，还可以防止质粒和目的基因自身环化或反向连接现象发生用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割不仅能够使目的基因插入到T-DNA片段中，还可以防止质粒和目的基因自身环化或反向连接现象发生。
（3）据图2分析，筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含四环素或卡那霉素四环素或卡那霉素（填“四环素“、“卡那霉素“或“四环素或卡那霉素“）的培养基上进行，植物基因工程中将目的基因导入受体细胞除了农杆菌转化法之外，还可采取基因枪法、花粉管通道法基因枪法、花粉管通道法（答出1种即可），要确认抗病毒番茄是否培育成功，从个体水平进行检测，要对培育出的番茄做病毒接种病毒接种实验。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】碱基互补配对原则；dCTP；耐高温的DNA聚合酶；14；Ⅰ和Ⅱ；用限制酶Ⅰ和Ⅱ切割不仅能够使目的基因插入到T-DNA片段中，还可以防止质粒和目的基因自身环化或反向连接现象发生；四环素或卡那霉素；基因枪法、花粉管通道法；病毒接种
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：8引用：2难度：0.7
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
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