新冠病毒（SARS-CoV-2）的重组蛋白疫苗、核酸疫苗（包括DNA疫苗和RNA疫苗）等疫苗都在研发当中。下图为其中一种疫苗的研发思路；图中①～⑦表示过程，B处箭头表示NcoⅠ、SphⅠ、NheⅠ、BamHⅠ的酶切位点（四种酶的识别序列详见表），标记基因SUC2控制合成蔗糖酶，使P型酵母菌能利用培养基中的蔗糖生存。

限制酶	NcoⅠ	SphⅠ	NheⅠ	BamHⅠ
识别序列和切割位点	C↓CATGG	GCATG↓C	G↓GATCC	G↓CTAGC

（1）图中①过程需要使用

逆转录（酶）

逆转录（酶）

酶先得到cDNA，再使用

PCR

PCR

技术扩增得到s蛋白基因。
（2）为使③过程顺利进行，需先使用限制酶

NheⅠ和BamHⅠ

NheⅠ和BamHⅠ

切割质粒B，再选用两种限制酶对新冠病毒的S蛋白基因进行切割的目的是

防止 S 蛋白基因自身环化、防止 S 蛋白基因与运载体反向连接、防止运载体自身环化

防止 S 蛋白基因自身环化、防止 S 蛋白基因与运载体反向连接、防止运载体自身环化

（答出1点即可）。
（3）S蛋白基因整合到受体细胞基因组上，最终能否翻译出S蛋白至关重要，因此需要进行蛋白质的检测，从受体细胞中提取

蛋白质

蛋白质

后，然后利用相应的

抗体

抗体

进行检测。
（4）为检验疫苗的效果，常常将重组疫苗注入志愿者体内，参加临床试验的志愿者需要满足的条件之一是

无

无

（ 选填“有”或“无”） SARS-CoV-2感染史。重组疫苗注入志愿者体内后，S蛋白基因指导合成的S蛋白作为抗原，刺激机体产生能与之相结合的抗体，

抗体的分泌量

抗体的分泌量

可作为检测疫苗对志愿者免疫效果的指标。