钙依赖蛋白激酶（CDPK）在植物的信号传导和提高植物抗性方面发挥着重要作用。科学家通过将CDPK基因导入拟南芥（双子叶植物）中，来获得具有抗性的新品种。如图为某种质粒表达载体和含CDPK基因的DNA片段示意图，图中标记了限制酶的切割位点。据此回答下列问题：
（1）通过基因工程，将CDPK基因导入拟南芥中，获得具有抗性的新品种的育种原理是 基因重组基因重组。为了使CDPK基因插人质粒中，应选取 SmalI和XbaISmalI和XbaI（两种限制性核酸内切酶）分别切割质粒和含目的基因的DNA片段。
（2）利用PCR可获得大量的CDPK基因，PCR扩增的第一步：用微量移液器在微量离心管中加入缓冲液、4种脱氧核苷酸的等量混合液、水、还需要加入 TaqDNA聚合酶，两种引物和模板DNATaqDNA聚合酶，两种引物和模板DNA。PCR的产物一般通过琼脂凝胶电泳来鉴定，在凝胶中的DNA分子的迁移速率 凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象有关。
（3）将CDPK基因导入拟南芥细胞通常采用的方法是 农杆菌转化法农杆菌转化法。
（4）检测CDPK基因是否成功表达的方法是 抗原—抗体杂交抗原—抗体杂交，若有杂交带出现，表明已产生了CDPK。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】基因重组；SmalI和XbaI；TaqDNA聚合酶，两种引物和模板DNA；凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象；农杆菌转化法；抗原—抗体杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：5引用：1难度：0.7
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发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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