CD47是一种跨膜糖蛋白，肺癌、结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量明显高于正常细胞。研究发现，利用抗体抑制肿瘤细胞表面的CD47蛋白的活性，可促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞。为制备抗CD47的单克隆抗体，科学家按如图1流程进行相关实验。请回答下列问题：
（1）图1EcoRI等均为限制酶，Kanr、Tcr分别为卡那霉素抗性基因、四环素抗性基因。为了构建基因表达载体，应该选用 BamHI和XhoIBamHI和XhoI酶切割外源DNA和质粒DNA。
（2）为筛选成功导入重组质粒的大肠杆菌，利用图中两种标记基因，筛选出 能在含卡那霉素的培养基上生长，而不能在含四环素的培养基上生长能在含卡那霉素的培养基上生长，而不能在含四环素的培养基上生长的大肠杆菌，利用该菌种获得大量CD47蛋白。
（3）图2中①是指从小鼠 脾脏脾脏中获得免疫后B细胞，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行操作②克隆化培养和抗体检测克隆化培养和抗体检测才可获得能分泌抗CD47抗体的杂交瘤细胞。体外培养该细胞获得大量单克隆抗体，需要满足以下条件：无菌无毒环境，充足的营养和适宜温度与pH，含有 95%空气加5%CO295%空气加5%CO2的气体环境。
（4）为验证抗CD47抗体对巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的促进作用，研究人员将巨噬细胞和肿瘤细胞共同培养，加入适量抗CD47抗体，测定巨噬细胞的吞噬能力。要得出该结论还需要进行的操作是 共同培养巨噬细胞和肿瘤细胞，但不加入抗CD47抗体，测定巨噬细胞的吞噬能力共同培养巨噬细胞和肿瘤细胞，但不加入抗CD47抗体，测定巨噬细胞的吞噬能力。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】BamHI和XhoI；能在含卡那霉素的培养基上生长，而不能在含四环素的培养基上生长；脾脏；克隆化培养和抗体检测；95%空气加5%CO2；共同培养巨噬细胞和肿瘤细胞，但不加入抗CD47抗体，测定巨噬细胞的吞噬能力
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：48引用：6难度：0.7
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
