白叶枯病是造成我国重要粮食作物--水稻严重减产的重要原因之一。某科研团队将白叶枯病抗性基因Xa21与质粒重组（图1），利用人工破损处理的水稻幼苗细胞借助根癌农杆菌转化法获得抗白叶枯病的水稻品种，其中根癌农杆菌侵染植物细胞过程如图2所示，已知不同种限制酶识别序列不同。请回答：
（1）构建图1基因表达载体时，最佳方案是使用 BamHⅠ、HindⅢBamHⅠ、HindⅢ分别处理含 Xa21基因的DNA片段和Ti质粒，该方案不仅可以避免处理后的白叶枯病抗性基因Xa21和Ti质粒发生 自身环化和反向链接自身环化和反向链接也能确保Xa21基因定点插入Ti质粒的 T-DNA片段T-DNA片段。
（2）基因表达载体上M抗生素抗性基因的作用是 有利于重组Ti质粒的筛选有利于重组Ti质粒的筛选，Ti质粒中除图中包含的构件外还应必备的构件有 复制原点、启动子、终止子复制原点、启动子、终止子。
（3）由图2可知，水稻幼苗细胞受损后会产生某些信号分子，用于吸引农杆菌移向受损水稻，这些信号分子可能是 酚类化合物酚类化合物，信号传导到根癌农杆菌细胞内激活了Ti质粒上的Vir区中的多个基因表达，其表达的蛋白质的功能有 组装形成通道复合体、催化产生单链T-DNA片段、与单链T-DNA片段结合形成成熟T复合体组装形成通道复合体、催化产生单链T-DNA片段、与单链T-DNA片段结合形成成熟T复合体（至少写两个）。农杆菌细胞内形成的成熟T复合体借助细胞膜上的通道复合体定向进入水稻幼苗细胞，最终目标是 将含有Xa2l基因的T-DNA整合到水稻细胞染色体DNA上将含有Xa2l基因的T-DNA整合到水稻细胞染色体DNA上。
（4）将含白叶枯病抗性基因Xa21的水稻幼苗细胞经过 植物组织培养植物组织培养技术可发育成幼苗。经检测，科研人员发现部分获得Xa21基因的水稻幼苗不具有抗白叶枯病的能力，原因可能是 Xa2l基因转录或翻译异常Xa2l基因转录或翻译异常。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】BamHⅠ、HindⅢ；自身环化和反向链接；T-DNA片段；有利于重组Ti质粒的筛选；复制原点、启动子、终止子；酚类化合物；组装形成通道复合体、催化产生单链T-DNA片段、与单链T-DNA片段结合形成成熟T复合体；将含有Xa2l基因的T-DNA整合到水稻细胞染色体DNA上；植物组织培养；Xa2l基因转录或翻译异常
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：34引用：7难度：0.7
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
