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黄曲霉是一种通过孢子繁殖的腐生真菌，能产生天然致癌物--黄曲霉素BL（AFB1），AFB1是一种只含有C、H、O的有机物。科研人员通过研究推测，黄海海域沉积物中存在能够抑制黄曲霉生长繁殖、并能利用降解黄曲霉素的海洋放线菌。
（1）请设计实验筛选出能利用降解AFB1的海洋放线菌，（用文字和“→”表示主要过程）取10g黄海海域沉积物溶于90mL无菌水，摇匀、过滤，取上清液稀释涂布平板法接种到以AFB1为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，获得能利用降解黄曲霉毒素的海洋放线菌的单菌落取10g黄海海域沉积物溶于90mL无菌水，摇匀、过滤，取上清液稀释涂布平板法接种到以AFB1为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，获得能利用降解黄曲霉毒素的海洋放线菌的单菌落。
（2）在对（1）中得到的放线菌进行抑菌活性测定
①配制真菌培养基并灭菌，待其温度降至50℃-55℃时加入黄曲霉孢子悬液混匀，然后倒平板，在适宜的温度下培养。
②在①获得的平板中放置直径为8mm的牛津杯（无底，见图1），将（1）中得到的多株放线菌单独扩大培养后的菌液，分别加入到牛津杯中，培养一段时间后，观察并测量抑菌圈直径抑菌圈直径可判断抑菌效果，原理是若放线菌能分泌杀死黄曲霉菌的物质，抑菌圈的直径将大于牛津杯直径，且分泌的量越多或抑菌活性越强，抑菌圈直径越
大若放线菌能分泌杀死黄曲霉菌的物质，抑菌圈的直径将大于牛津杯直径，且分泌的量越多或抑菌活性越强，抑菌圈直径越
大。
（3）读出（2）中4 株抑菌效果较好的菌株分别扩大培养，制备同浓度菌液通过酶联免疫法检测其对AFBI的降解情况，准确筛选出能高效降解AFBI的菌株。操作流程如图2中的图甲、原理如图乙。
①在酶联免疫操作中，实验组的“加样液”过程如下：将等量的AFB1等量的AFB1分别加入到上述4株同浓度等量的菌液中在适宜条件下培养一段时间后，再将其加在膜上。
②依据实验原理分析，通过观察蓝色深浅蓝色深浅可以判断上述4株菌株对 AFBI的降解能力，原因是菌种降解AFB1的效果越好，发酵液中含有的AFB1越少，能够结合的酶标二抗越少，催化生成的蓝色产物越少，蓝色越浅菌种降解AFB1的效果越好，发酵液中含有的AFB1越少，能够结合的酶标二抗越少，催化生成的蓝色产物越少，蓝色越浅。
大
大
【答案】取10g黄海海域沉积物溶于90mL无菌水，摇匀、过滤，取上清液稀释涂布平板法接种到以AFB1为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，获得能利用降解黄曲霉毒素的海洋放线菌的单菌落；抑菌圈直径；若放线菌能分泌杀死黄曲霉菌的物质，抑菌圈的直径将大于牛津杯直径，且分泌的量越多或抑菌活性越强，抑菌圈直径越
大；等量的AFB1；蓝色深浅；菌种降解AFB1的效果越好，发酵液中含有的AFB1越少，能够结合的酶标二抗越少，催化生成的蓝色产物越少，蓝色越浅
大；等量的AFB1；蓝色深浅；菌种降解AFB1的效果越好，发酵液中含有的AFB1越少，能够结合的酶标二抗越少，催化生成的蓝色产物越少，蓝色越浅
【解答】
【点评】
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发布：2024/12/2 8:0:1组卷：3引用：1难度：0.7
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1．回答下列关于微生物的问题．
阿拉伯胶是一种多糖，研究者从某地合欢树下距离地表深10～15cm处的土样中初筛到能合成阿拉伯胶降解酶的菌株SM01，以下为该菌株的鉴定过程．
（1）为获得单菌落，可采用平板划线法或法将初筛菌液接种在培养基上．46SM01菌落为粉白色，初期呈突起絮状，在显微镜下观察到，菌丝白色致密，且有分生孢子，细胞核直径约1μm,初步推测为真菌，则其特征中，最能说明SM01是真菌的是有细胞核，且有分生孢子．SM01还一定具有的结构有（多选）．
A．细胞膜 B．核糖体 C．拟核 D．荚膜
（2）表中培养液pH均为6.0，若对SM01中阿拉伯胶降解酶的活力进行测定，则应选用表中的培养液，针对不选用的其他培养液，分别说明原因：
①缺少，SM01不能很好生长
②具有，会影响对SM01自身产生的酶活力的测定结果
③缺乏，会影响SM01的生长，也无法对阿拉伯胶酶活力进行测定．
表 试验用培养液配方培养液 阿拉伯胶 阿拉伯胶酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4•7H2O KCl FeSO4•7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L发布：2025/1/2 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一种广泛应用的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某研究小组从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其计数（如图所示），以期为修复污染土壤提供微生物资源。下列叙述错误的是（ ）
发布：2024/12/31 4:0:1组卷：17引用：3难度：0.7 -
3．为了防治大气污染，烟气脱硫是环保领域迫切需要解决的问题．研究人员为了获得用于烟气脱硫的脱硫细菌，并了解其生长规律，进行了如下操作．请回答下列问题：
（1）采样与细菌的筛选：在某热电厂烟囱周围区域要尽量做到采集土样．为确保能够从样品中分离到所需要的烟气脱硫细菌，可以通过增加脱硫菌的浓度．
（2）驯化脱硫细菌：将筛选出的脱硫细菌接种于有少量无菌水的三角瓶中，边搅拌边持续通入SO2气体几分钟，然后接种到培养基上，待长出菌落后再重复上述步骤，并逐步延长通SO2的时间，同时逐步降低培养基的pH．此操作的目的是分离出的脱硫细菌．
（3）培养与观察：一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），驯化后的脱硫细菌表现出稳定的特征．用高倍显微镜（填“可以”或“不可以”）观察到脱硫细菌的核糖体．
（4）探究生长规律：在计数时，计数方法有稀释涂布平板法和直接计数法．在用稀释涂布平板法进行计数时，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的；通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌，通常推测统计的菌落数往往比活菌的实际数目．发布：2025/1/1 8:0:2组卷：6引用：2难度：0.5
