大米铁含量极低，科研人员通过基因工程、植物组织培养等现代生物技术，培育出了铁含量比普通大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。如图为培育转基因水稻的过程示意图，其中①-⑥为过程，ECORⅠ、HindⅢ、BamHⅠ为限制酶。
（1）完成图中①过程需选用的限制酶是 BamHI和HindⅢBamHI和HindⅢ。构建的基因表达载体除了图中所给部分外，还必须有启动子复制原点和 终止子终止子，所填结构的作用是 使转录在所需要的地方停下来使转录在所需要的地方停下来。
（2）用图示方法将目的基因导入到水稻细胞中利用Ti质粒 BB（填A/B/C）部分上的T-DNA，T-DNA的作用是 将启动子和铁合蛋白基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上将启动子和铁合蛋白基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上。
（3）PCR是获取大量目的基因的一种方法，PCR反应体系的成分中有两种引物，在复性时引物会结合到互补的DNA链上，对两种引物的设计要求之一是：两种引物之间不能碱基互补配对，试分析原因 防止引物之间结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率防止引物之间结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率；引物的作用是 使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。
（4）图示④和⑤过程所用的培养基在成分上的最大区别是 激素的种类及比例不同激素的种类及比例不同。为了筛检成功导入质粒的农杆菌，1号培养基需要加入 潮霉素潮霉素，这种培养基称为选择培养基。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】BamHI和HindⅢ；终止子；使转录在所需要的地方停下来；B；将启动子和铁合蛋白基因带入玉米细胞并整合到玉米细胞染色体DNA上；防止引物之间结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率；使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；激素的种类及比例不同；潮霉素
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：21引用：2难度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
