PCR技术于1985年诞生，应用十分广泛，几乎包括生物技术的各个方面，例如：分离与扩增目的基因，基因表达的研究，DNA测序以及基因诊断等。回答下列问题：
（1）PCR技术扩增目的基因的前提是 已知一段目的基因的核苷酸序列已知一段目的基因的核苷酸序列，以便根据此前提合成引物，引物的作用是 使Taq酶能从引物的3'端连接脱氧核苷酸使Taq酶能从引物的3'端连接脱氧核苷酸以mRNA为模板进行的特殊PCR技术，过程如图1，该过程所需要的酶有 逆转录酶逆转录酶和 Taq酶Taq酶。
（2）一定浓度范围内，模板浓度与PCR产物的浓度呈正比。在RT-PCR过程中加入Taq Man探针，原理如图2所示，Taq Man探针序列对应待扩增的目的基因的序列，在其5'端连接一个报告荧光基团（R），在其3'端连接一个淬灭荧光基因（Q），探针完整时，报告荧光基团与淬灭荧光基团位置接近，发射的荧光被淬灭剂吸收，荧光强度很低。PCR过程中Taq酶从5'端切断Taq Man探针，释放荧光基团。根据荧光强度可对PCR产物进行定量分析，原理是 随着PCR循环次数的增加，释放的荧光基团也会越多，荧光就会越强随着PCR循环次数的增加，释放的荧光基团也会越多，荧光就会越强。根据PCR产物的浓度又可以估算 起始模板mRNA起始模板mRNA的浓度，以此代表目的基因在特定组织中的表达量。
（3）利用PCR技术，在引物的某个特定位点引入一个或多个不能与目的基因配对的碱基，就可以在目的基因中带来定点突变，据此获得的目的基因再经表达、纯化获得蛋白质，该过程属于 蛋白质工程蛋白质工程（填工程技术）的范畴。
【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】已知一段目的基因的核苷酸序列；使Taq酶能从引物的3'端连接脱氧核苷酸；逆转录酶；Taq酶；随着PCR循环次数的增加，释放的荧光基团也会越多，荧光就会越强；起始模板mRNA；蛋白质工程
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：12引用：1难度：0.6
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1．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
2．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：3引用：3难度：0.7
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