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为研究30Kc6蛋白对家蚕细胞凋亡的抑制作用,请根据以下提供材料与用具,以家蚕细胞的细胞数目变化和DNA碎片化为测定指标,完善实验思路,预测实验结果并进行分析与讨论。
材料与用具:家蚕细胞悬液、一定浓度的 H2O2溶液、30Kc6蛋白溶液、培养液、培养瓶、血细胞计数板、显微镜、DNA碎片化测定试剂盒等。
(要求与说明:细胞计数的具体操作过程和DNA碎片化测定试剂盒的具体操作不做要求,不考虑加入溶液对体积的影响,实验条件适宜)
回答下列问题:
(一)实验思路:
①取家蚕细胞悬液加入到含培养液的培养瓶中,用血细胞计数板在显微镜下计数,用DNA碎片化测定试剂盒检测DNA碎片化情况,并记录。
②将各瓶细胞悬液随机均分为A、B、C、D4组,A、B组用适量且等量的一定浓度的H2O2溶液处理,C、D组不作处理。
每隔一段时间,分别去上述4组培养瓶内的培养物,用血细胞计数板在显微镜下计数,用DNA碎片化测定试剂盒检测DNA碎片化情况,并记录
每隔一段时间,分别去上述4组培养瓶内的培养物,用血细胞计数板在显微镜下计数,用DNA碎片化测定试剂盒检测DNA碎片化情况,并记录

当细胞数量和DNA碎片化程度达到一定值时,向B、C组分别加入等量且适量的30Kc6蛋白溶液
当细胞数量和DNA碎片化程度达到一定值时,向B、C组分别加入等量且适量的30Kc6蛋白溶液

⑤重复步骤 3,统计并分析所得的数据。
(二)预测实验结果(以坐标曲线图形式表示DNA碎片化程度变化情况,并标出加入药物的时间点):

(三)分析讨论
①细胞凋亡过程除了DNA碎片化外,同时还伴随着线粒体的破裂现象,这些现象都是基因
选择性表达
选择性表达
的结果。
②实验用H2O2需要控制特定浓度的原因是
H2O2引起细胞凋亡的作用效应与浓度有关
H2O2引起细胞凋亡的作用效应与浓度有关
,若想建立细胞凋亡模型除了要考虑H2O2浓度外,还需要考虑
H2O2作用时间
H2O2作用时间
。为获得这两个因素的最佳组合需要设计怎样的实验方案?
设置不同浓度以及每个浓度的不同作用时间处理,观察各组细胞的细胞凋亡率
设置不同浓度以及每个浓度的不同作用时间处理,观察各组细胞的细胞凋亡率
。(简要方案说明)

【考点】细胞死亡
【答案】每隔一段时间,分别去上述4组培养瓶内的培养物,用血细胞计数板在显微镜下计数,用DNA碎片化测定试剂盒检测DNA碎片化情况,并记录;当细胞数量和DNA碎片化程度达到一定值时,向B、C组分别加入等量且适量的30Kc6蛋白溶液;;选择性表达;H2O2引起细胞凋亡的作用效应与浓度有关;H2O2作用时间;设置不同浓度以及每个浓度的不同作用时间处理,观察各组细胞的细胞凋亡率
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:24引用:1难度:0.6
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