消癌平是乌骨藤提取物水溶液,临床上治疗胃癌已获良好疗效。欲进一步研究其对癌症的作用效果,某研究人员进行了以下实验。
实验材料:人胃癌细胞SGC-7901细胞株,96孔板,细胞培养液,50mg/mL的消癌平、生理盐水,CO2培养箱,MTT作用液(一种检测细胞存活和生长的试剂)等
实验思路:
取对数生长的细胞,计数后配制成细胞悬液,随后加入96孔板,置于37℃CO2培养箱。将细胞悬液均分成6组,用生理盐水和药物(不同浓度的消癌平)作用7d,加MTT作用液,测OD值,计算药物对肿瘤细胞生长的抑制率。抑制率=(对照组OD540-加药组OD540)/对照组OD540×100%.回答下列问题:
(1)癌细胞增殖情况的判定可通过细胞计数,常采用血细胞计数法,若本实验用的对数生长期细胞数量要达到5×106个/mL,则采用25(中)×16(小)规格,每小格高度0.10mm,面积1100mm2的计数板,计数总数需达400400个癌细胞;此外癌细胞标志分泌物的检查,也是临床常用方法。本实验中可取经培养后的癌细胞悬液,进行离心后取细胞上清液离心后取细胞上清液来检测。
(2)请设计实验结果记录表
组别
OD540
抑制率%
空白对照(生理盐水)
10mg/mL的消癌平
20mg/mL的消癌平
30mg/mL的消癌平
40mg/mL的消癌平
50mg/mL的消癌平
组别
OD540
抑制率%
空白对照(生理盐水)
10mg/mL的消癌平
20mg/mL的消癌平
30mg/mL的消癌平
40mg/mL的消癌平
50mg/mL的消癌平
。
(3)分析与讨论:
①用流式细胞仪检测消癌平针剂对人胃癌(SGC-7901)细胞的作用机理如图,则抑制作用在细胞周期G1G1时期,关于抑制作用方式,请你提出合理的假设消癌平抑制了DNA的复制,消癌平抑制了RNA的合成等消癌平抑制了DNA的复制,消癌平抑制了RNA的合成等。

②若采用体内试验的方法研究消癌平对人胃癌细胞治疗作用,在将人胃癌(SGC-7901)细胞制备成的细胞凝块接种到小鼠体内时,应对小鼠作免疫抑制免疫抑制处理。
③为了更全面地了解消癌平对癌细胞的治疗效果,还可以从不同癌细胞种类;不同接种天数、细胞形态学观察等不同癌细胞种类;不同接种天数、细胞形态学观察等方面开展研究。(请答出2点)
1
100
组别 | OD540 | 抑制率% |
空白对照(生理盐水) | ||
10mg/mL的消癌平 | ||
20mg/mL的消癌平 | ||
30mg/mL的消癌平 | ||
40mg/mL的消癌平 | ||
50mg/mL的消癌平 |
组别 | OD540 | 抑制率% |
空白对照(生理盐水) | ||
10mg/mL的消癌平 | ||
20mg/mL的消癌平 | ||
30mg/mL的消癌平 | ||
40mg/mL的消癌平 | ||
50mg/mL的消癌平 |
【考点】细胞的癌变的原因及特征.
【答案】400;离心后取细胞上清液;
;G1;消癌平抑制了DNA的复制,消癌平抑制了RNA的合成等;免疫抑制;不同癌细胞种类;不同接种天数、细胞形态学观察等
组别 | OD540 | 抑制率% |
空白对照(生理盐水) | ||
10mg/mL的消癌平 | ||
20mg/mL的消癌平 | ||
30mg/mL的消癌平 | ||
40mg/mL的消癌平 | ||
50mg/mL的消癌平 |
【解答】
【点评】
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