B基因存在于水稻基因组中,其在体细胞和精子中正常表达,在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响,设计并完成了如图实验来获取能够在卵细胞中表达B基因的转基因植株。请回答下列问题:

注:Luc基因表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光
(1)图中所示的基因表达载体需含有启动子,它是RNA聚合酶RNA聚合酶 识别并结合的位点。
(2)可利用水稻体细胞或精子水稻体细胞或精子中的RNA构建cDNA文库,从中获得B基因中编码蛋白的序列。将该序列与Luc基因连接成融合基因(表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能),然后构建基因表达载体。与基因组文库相比,cDNA文库的基因数相对较少,原因是cDNA文库是用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的cDNA片段构建而成的,因此只含有该种生物的一部分基因(已转录的基因);而基因组文库含有该生物的全部基因cDNA文库是用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的cDNA片段构建而成的,因此只含有该种生物的一部分基因(已转录的基因);而基因组文库含有该生物的全部基因。
(3)基因工程操作的核心步骤是构建基因表达载体构建基因表达载体。
(4)要判断T-DNA是否整合到水稻细胞染色体DNA上,可采用DNA分子杂交DNA分子杂交的方法进行检测。
(5)可以通过检测加入荧光素荧光素后该植株卵细胞中是否发出荧光,鉴定和筛选出能表达B基因的转基因植株。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】RNA聚合酶;水稻体细胞或精子;cDNA文库是用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的cDNA片段构建而成的,因此只含有该种生物的一部分基因(已转录的基因);而基因组文库含有该生物的全部基因;构建基因表达载体;DNA分子杂交;荧光素
【解答】
【点评】
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发布:2024/4/20 14:35:0组卷:40引用:5难度:0.7
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