阅读下列材料，完成19、20题
材料：链霉素、卡那霉素、庆大霉素等都属于氨基糖苷类抗生素。细菌和多数线粒体的核糖体沉降系数为70S，可解离为50S和30S亚基，而真核细胞细胞所核糖体沉降系数为80S，可解离为60S和40S亚基。氨基糖苷类抗生素通过诱导细菌合成错误蛋白质或无法合成蛋白质等；导致细菌死亡。氨基糖苷类抗生素的杀菌机制主要有三种（如图所示）：①抑制30S核糖体亚基的组装；②抑制tRNA的5′端成熟，导致tRNA无法与mRNA结合；③导致非互补配对的tRNA也能够结合于mRNA上。链霉素、卡那霉素、庆大霉素等既可用于临床上细菌感染的治疗，也广泛应用于基因工程中微生物的选择培养。
质粒是基因工程中广泛使用的载体，为获得适宜的质粒，对大肠杆菌的质粒A和质粒B进行改造。如图为质粒A和质粒B的示意图，其中EcoR1和BumH1为限制酶识别部位；ori为复制原点；npt表示卡那霉素抗性基因，str表示链霉素抗性基因；gfp表示绿色荧光蛋白基因（质粒B中不含其启动子），其产物在紫外线照射下可发出绿色荧光；Pl是含有受乳糖诱导表达启动子的序列；P2是通用启动子序列。
（1）质粒中启动子的作用是是RNA聚合酶结合和识别的部位是RNA聚合酶结合和识别的部位。
（2）质粒B作为载体时可直接作为标记基因的是strstr。
（3）已知三个或三个以上DNA片段发生连接的几率很小，可忽略：两个或两个以上质粒难以同时进入大肠杆菌：含有两个或两个以上ori的质粒无法在大肠杆菌内复制。为获得可发绿色荧光的大肠杆菌。进行以下操作：
①将含质粒A和质粒B的混合溶液中加入限制酶EcoR1和BamH1EcoR1和BamH1，充分反应后加入DNA连接酶，再将产物导入大肠杆菌；
②将这些大肠杆菌涂布在含有链霉素链霉素的固体培养基上在适宜条件下培养24h,能淘汰掉部分不含绿色荧光蛋白基因的大肠杆菌菌落；
③含有目标质粒的大肠杆菌需要在培养基中加入乳糖乳糖能在紫外线照射下发出绿色荧光。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】是RNA聚合酶结合和识别的部位；str；EcoR1和BamH1；链霉素；乳糖
【解答】
【点评】
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发布：2024/12/12 8:0:1组卷：10引用：0难度：0.7
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（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
