在转基因抗盐烟草的研究过程中,采用了图示质粒。其上有SalⅠ,HindⅢ和BamHⅠ三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因,获得此质粒的农杆菌表现出对两种抗生素的抗性。

(1)在构建重组质粒时,选用 HindⅢHindⅢ和SalⅠ两种限制酶切割目的基因的两端及质粒,可防止 目的基因和质粒的自我环化或反向连接目的基因和质粒的自我环化或反向连接。
(2)用分别含有氨苄青霉素和四环素的培养基筛选农杆菌时,发现含有目的基因的农杆菌不能在含四环素的培养基上生长,这说明 抗四环素基因被破坏抗四环素基因被破坏。
(3)采用农杆菌感染烟草细胞是因其体内的重组Ti质粒上的 T-DNAT-DNA能将目的基因插入到烟草细胞的染色体DNA上。
(4)用植物组织培养技术培育转基因抗盐烟草植株,依据的原理是 植物细胞的全能性植物细胞的全能性。
(5)导入抗盐基因的烟草是否可以表达其遗传特性,需检测 抗盐基因是否转录出mRNA,是否翻译出蛋白质抗盐基因是否转录出mRNA,是否翻译出蛋白质,除上述分子水平检测外还需进行 个体水平上抗盐个体水平上抗盐鉴定。
【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】HindⅢ;目的基因和质粒的自我环化或反向连接;抗四环素基因被破坏;T-DNA;植物细胞的全能性;抗盐基因是否转录出mRNA,是否翻译出蛋白质;个体水平上抗盐
【解答】
【点评】
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