新冠疫情后，病毒核酸检测和疫苗接种在疫情防控中发挥了重要作用，回答下列问题。
（1）新冠病毒是一种RNA病毒，检测新冠病毒RNA（核酸检测）可以采取RT-PCR法，该过程中需要用到的酶有 逆转录酶、TaqDNA聚合酶逆转录酶、TaqDNA聚合酶。
（2）为了确保新冠病毒核酸检测的准确性，在设计PCR引物时必须依据新冠病毒RNA中的来进行。据图1分析，选择的引物是 Ⅱ、ⅢⅡ、Ⅲ。其作用是 使TaqDNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸使TaqDNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。
（3）下表是SARS-CoV-2核酸检测时PCR仪参数设定要求；
| 步骤 | a、病毒cDNA合成 | b、预变性 | c、变性 | d、？ |
| 温度 | 50℃ | 95℃ | 95℃ | 60℃ |
| 时间 | 15min | 5min | 5s | 40s |
| 循环 | 1 | 1 | 45 | |
保证样本中病毒RNA均能逆转录形成cDNA
保证样本中病毒RNA均能逆转录形成cDNA
。②步骤d的主要包括PCR过程的
复性、延伸
复性、延伸
阶段。（4）PCR的产物一般通过电泳来鉴定，结果如图2所示。1号泳道为标准（Marker），2号泳道为阳性对照（提纯的目的基因片段），3号泳道为实验组。标准（Marker）的实质为不同已知长度的DNA片段混合物：3号泳道的若出现杂带，原因一般有
模板受到污染；引物的特异性不强；复性温度偏低；Mg2+浓度过高等
模板受到污染；引物的特异性不强；复性温度偏低；Mg2+浓度过高等
（至少答出两点）。（5）某人同时进行了新冠病毒核酸检测和抗体检测（检测体内是否有新冠病毒抗体），若核酸检测结果为阴性而抗体检测结果为阳性，说明
曾经感染过新冠病毒但已康复
曾经感染过新冠病毒但已康复
（答出1种情况即可）；若核酸检测结果为阳性而抗体检测为阴性，说明 己感染新冠病毒，还未康复
己感染新冠病毒，还未康复
。【考点】DNA片段的扩增与电泳鉴定．
【答案】逆转录酶、TaqDNA聚合酶；Ⅱ、Ⅲ；使TaqDNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸；保证样本中病毒RNA均能逆转录形成cDNA；复性、延伸；模板受到污染；引物的特异性不强；复性温度偏低；Mg2+浓度过高等；曾经感染过新冠病毒但已康复；己感染新冠病毒，还未康复
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：9引用：2难度：0.5
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1．科学家为了提高光合作用过程中Rubiaco酶对CO2的亲和力，利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题：
（1）PCR定点突变技术属于（填“基因工程”或“蛋白质工程”）。可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用将基因表达载体导入植物细胞，还需用到植物细胞工程中的技术，才能最终获得转基因植物。
（2）PCR过程所依据的原理是。利用PCR技术扩增，若将一个目的基因复制10次，则需要在缓冲液中至少加入个引物。
（3）目的基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。科研人员通过实验研究发现培育的该转基因植株的光合作用速率并未明显增大，可能的原因是。
（4）另有一些科学家利用生物技术将人的生长激素基因导入小鼠受精卵的细胞核中，经培育获得一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。有关叙述错误的是。
A．选择受精卵作为外源基因的受体细胞是因为这种细胞的全能性最容易表达
B．采用DNA分子杂交技术可检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达
C．人的生长激素基因能在小鼠细胞表达，说明遗传密码在不同种生物中可以通用
D．将转基因小鼠体细胞进行核移植（克隆），可以获得多个具有外源基因的后代发布：2025/1/16 8:0:1组卷：14引用：2难度：0.6 -
2．数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术，其原理如图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：7引用：2难度：0.6 -
3．下列关于DNA片段扩增及其鉴定的说法错误的是（ ）
发布：2024/12/30 23:30:2组卷：3引用：3难度：0.7
