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利用基因工程获取人干扰素-α的方法有两种:一是将IFN-α基因导入细菌,从细胞外分离获取;二是将IFN-α基因导入毕赤酵母菌,结合现代工艺从细胞内获取。请回答:
(1)基因工程中构建的表达载体一般包括
复制原点
复制原点
、标记基因、启动子序列、目的基因和终止子序列。其中标记基因的作用是
筛选重组质粒
筛选重组质粒
,启动子是
RNA聚合
RNA聚合
酶的结合位点。
(2)微生物代谢中合成用于自身生长发育的物质称为初级代谢产物,随后产生并分泌到细胞外的生物碱、抗菌素及细菌毒素称为次级代谢产物。将IFN-α基因导入细胞,由于缺少细胞器
内质网
内质网
参与肽链的加工导致表达的干扰素-α无糖链结构;从产物角度分析,将该基因导入酵母菌与导入细菌相比获得的抗生素更纯且活性更高的原因有
细胞内合成不需要分泌到细胞外;避免细菌毒素的副作用
细胞内合成不需要分泌到细胞外;避免细菌毒素的副作用
。(答两点)。
(3)毕赤酵母菌在发酵罐中具有高密度的特点,下图示营养比例及氧气含量对酵母菌产干扰素-α的影响结果。
①酵母菌培养基中的蛋白粉被用作
氮源
氮源

②5%O2条件下,后期干扰素-α合成量急剧下降的原因可能是
酵母菌无氧呼吸产生酒精
酵母菌无氧呼吸产生酒精
毒害酵母菌。制备酵母培养基的过程中,除了配制相关的营养成分外,还需要
适宜的温度和pH
适宜的温度和pH
保证酶的活性。生产上为节约成本,一般在发酵的后期可通过补充
适当比例的碳源和氮源
适当比例的碳源和氮源
并适当
通入纯净空气
通入纯净空气

【答案】复制原点;筛选重组质粒;RNA聚合;内质网;细胞内合成不需要分泌到细胞外;避免细菌毒素的副作用;氮源;酵母菌无氧呼吸产生酒精;适宜的温度和pH;适当比例的碳源和氮源;通入纯净空气
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:17引用:1难度:0.5
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