回答与转基因雷公藤培育过程有关的问题：
（1）将含

纤维素酶和果胶

纤维素酶和果胶

酶的混合液在55℃水浴锅中活化，0.22μm微孔滤膜

过滤

过滤

灭菌。取雷公藤悬浮细胞，加入酶混合液，黑暗条件下

悬浮

悬浮

培养以分离原生质体。
（2）原生质体的活力检测采用台盼蓝染色法（台盼蓝可穿透死细胞的细胞膜，使死细胞中的DNA着色，但无法进入活细胞内），原生质体活力的计算方法为：

未被台盼蓝染色的原生质体

未被台盼蓝染色的原生质体

占该视野下原生质体总数的百分比。
（3）由于原生质体来源于黑暗条件下培养的雷公藤悬浮细胞，因此其细胞中不含

叶绿体

叶绿体

。将原生质体与含

绿色荧光蛋白基因

绿色荧光蛋白基因

 的植物表达载体质粒混合，在黑暗条件下完成转化后，再用激光作扫描光源的显微镜观察，统计发出绿色荧光的原生质体数占观察到的所有原生质体数的百分比，以此确认原生质体的转化效率。
（4）将转化后的原生质体进行培养，重新长出细胞壁，形成胚性细胞。此时，应该

降低

降低

培养基中甘露醇浓度，以利于胚性细胞继续培养形成细胞团，然后形成再生植株。再生植株需去除

根部残留的培养基

根部残留的培养基

处理并进行锻炼后才能移种大田。