云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫作用的毒素蛋白。如图1是4种限制酶及其所识别的序列与酶切位点，图2是转Bt毒素蛋白基因棉花的培育过程示意图，图2中a和b分别表示抗卡那霉素基因和抗四环素基因（棉花细胞中不含抗卡那霉素基因和抗四环素基因），据图回答下列问题：
（1）利用PCR技术扩增目的基因的原理是 DNA双链复制DNA双链复制，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成 引物引物，用此方法得到的所需目的基因至少要复制 33 次。
（2）基因工程的核心步骤是 基因表达载体的构建基因表达载体的构建，假设图3中质粒原来的BamH I识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶Bcl I识别位点的碱基序列，现用Bcl I和HindⅢ切割质粒，则目的基因右侧还能选择BamH I进行切割，并获得所需重组质粒吗？可以可以，请说明理由 切出的粘性末端相同切出的粘性末端相同。
（3）抗虫基因能在棉花细胞中表达，是因为不同生物共用 一套密码子一套密码子。导入重组质粒的棉花细胞能在含 四环素四环素（填抗生素种类）的培养基上生长。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】DNA双链复制；引物；3；基因表达载体的构建；可以；切出的粘性末端相同；一套密码子；四环素
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：40引用：2难度：0.1
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
