枯草芽孢杆菌产生的蛋白酶在医药和化工等领域具有重要的价值。为筛选蛋白酶产量高的枯草芽孢杆菌菌株，分别将浸过不同菌株的提收液（a～e）及无菌水（f）的无菌圆纸片置于平板培养基表面，在37℃恒温箱中放置2～3天，结果如图所示。请回答问题：
（1）在培养包括枯草芽孢杆菌在内的异养型微生物时，培养基营养成分应包括水和

无机盐、碳源、氮源

无机盐、碳源、氮源

，配制图1培养基的基本步骤是计算→称量→

熔化

熔化

→灭菌→倒平板。
（2）a～e中蛋白酶产量最高的南株是

a

a

 （用字母回答），判断依据是

a周围的透明圈最大，说明其产生的蛋白酶数量多

a周围的透明圈最大，说明其产生的蛋白酶数量多

。
（3）分离和纯化枯草芽孢杆菌可用稀释涂布平板法。在进行稀释涂布平板操作时，要将菌液进行一系列的

梯度稀释

梯度稀释

，涂布时，要将涂布器末端浸在盛有体积分数为

70%的酒精

70%的酒精

的烧杯中。
（4）工业上生产碱性蛋白酶成本高，目前可以采用

固定化酶

固定化酶

技术多次重复使用以降低成本。