陈薇团队和康希诺生物合作研发了腺病毒载体新冠疫苗Ad5-nCoV,科学家用新冠病毒S蛋白的基因构建到腺病毒基因组上,外壳仍然是腺病毒的正常外壳蛋白,但里面的DNA含有编码新冠病毒S蛋白的基因。请回答下列问题:
(1)Ad5腺病毒是无包膜的双链DNA病毒,作为基因工程的载体,为让外源S蛋白基因插入其中,Ad5腺病毒DNA分子上需要有 一个至多个限制酶切割位点一个至多个限制酶切割位点;Ad5腺病毒具有很强的感染人体细胞的能力,可能会产生一些症状,虽很少致人死亡,但为了安全,科学家仍需要对Ad5腺病毒基因进行 删除致病基因删除致病基因处理。
(2)新冠S蛋白基因是RNA片段,获取目的基因的方法可以用人工的方法合成,请推测从RNA反转录形成双链DNA的过程包含哪些步骤 第一步,以RNA为模板利用反转录酶合成一条与RNA互补的DNA单链,形成RNA-DNA杂交分子。第二步,核酸酶使RNA-DNA杂交分子中的RNA链降解,使之变成单链的DNA。第三步,以单链DNA为模板,在DNA聚合酶的作用下合成另一条互补的DNA链,形成双链DNA分子第一步,以RNA为模板利用反转录酶合成一条与RNA互补的DNA单链,形成RNA-DNA杂交分子。第二步,核酸酶使RNA-DNA杂交分子中的RNA链降解,使之变成单链的DNA。第三步,以单链DNA为模板,在DNA聚合酶的作用下合成另一条互补的DNA链,形成双链DNA分子。
(3)利用PCR扩增新冠S蛋白基因DNA片段使用的酶是 Taq酶(热稳定DNA聚合酶)Taq酶(热稳定DNA聚合酶)。PCR反应中的每次循环可分为 变性变性、复性、延伸三步,其中复性的结果是 两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
(4)腺病毒载体新冠疫苗Ad5-nCoV导入人体后,将编码新冠病毒S蛋白的基因整合到宿主细胞,在细胞质中合成S蛋白,由S蛋白激发 体液免疫和细胞免疫体液免疫和细胞免疫(填“细胞免疫”或“体液免疫”或“细胞免疫”和“体液免疫”)完成免疫应答。
【答案】一个至多个限制酶切割位点;删除致病基因;第一步,以RNA为模板利用反转录酶合成一条与RNA互补的DNA单链,形成RNA-DNA杂交分子。第二步,核酸酶使RNA-DNA杂交分子中的RNA链降解,使之变成单链的DNA。第三步,以单链DNA为模板,在DNA聚合酶的作用下合成另一条互补的DNA链,形成双链DNA分子;Taq酶(热稳定DNA聚合酶);变性;两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合;体液免疫和细胞免疫
【解答】
【点评】
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