噬菌体展示技术是将外源目标基因插入到噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,使目标蛋白被展示到噬菌体表面的生物技术(如图所示)。被展示的蛋白质可以保持相对独立的空间结构和生物活性,以利于靶分子的识别和结合。请分析回答:

(1)插入载体之前,目标基因一般需经PCR扩增。PCR扩增基因的原理是 DNA的半保留复制DNA的半保留复制。若目标基因的核苷酸序列未知,但已知其临近区域的上、下游的部分序列如下所示,请从表中所列引物中选出一对合适的引物用于目标基因的PCR扩增:乙和C乙和C。
5′-GACGCATTACGGTAAC••••••TCCAGCTTAGCAGTAA-3′
3′-CTGCGTAATGCCATTG••••••AGGTCGAATCGTCATT-5′
引物Ⅰ | 引物Ⅱ | ||
甲 | 5′-CTGCGTAATGCCATTG | A | 5′-AGGTCGAATCGTCATT |
乙 | 5′-GACGCATTACGGTAAC | B | 5′-TCCAGCTTAGCAGTAA |
丙 | 5′-GTTACCGTAATGCGTC | C | 5′-TTACTGCTAAGCTGGA |
丁 | 5′-CAATGGCATTACGCAG | D | 5′-AATGACGATTCGACCT |
它们的基本组成单位都是脱氧核苷酸,且都具有双链(双螺旋)结构
它们的基本组成单位都是脱氧核苷酸,且都具有双链(双螺旋)结构
;建立噬菌体展示库需用的工具酶有 限制酶和DNA连接酶
限制酶和DNA连接酶
。(3)目标蛋白的筛选利用了
抗原—抗体杂交
抗原—抗体杂交
方法,其原理是 抗体的结合具有特异性
抗体的结合具有特异性
。(4)扩大培养时,进行诱变处理的目的可能是通过提高某些基因的突变率而获取
具有更强生产目标蛋白能力的噬菌体
具有更强生产目标蛋白能力的噬菌体
;根据噬菌体的特征,扩大培养体系中必须含有 宿主细胞
宿主细胞
,噬菌体才能繁殖。多次筛选后,目标基因高效表达
目标基因高效表达
的噬菌体得到高度富集。【考点】噬菌体侵染细菌实验;目的基因的筛选与获取.
【答案】DNA的半保留复制;乙和C;它们的基本组成单位都是脱氧核苷酸,且都具有双链(双螺旋)结构;限制酶和DNA连接酶;抗原—抗体杂交;抗体的结合具有特异性;具有更强生产目标蛋白能力的噬菌体;宿主细胞;目标基因高效表达
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:4引用:1难度:0.6
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