干燥综合征(SS)是临床常见的一种自身免疫病,其血清中存在多种抗体,其中以SSB抗体特异性最强,影响最显著。科研人员为建立抗SSB抗体全自动定量检测的磁微粒化学发光试剂,利用基因工程技术获得重组SSB蛋白,流程如下,请分析回答:

(1)利用RNA通过①过程获得cDNA需要 逆转录逆转录酶。通过PCR技术扩增SSB基因的前提是要有 一段已知的SSB基因的核苷酸序列一段已知的SSB基因的核苷酸序列,以便合成引物。为与PET41a质粒连接,获得的目的基因A两端要含有 BamHⅠ和XhoⅠBamHⅠ和XhoⅠ酶切位点。
(2)获得含SSB基因的重组质粒后,进行如下实验切割原质粒和重组质粒,获得片段大小如下表(1kb=1000碱基对)(注意:DNA片段大小与图中所画比例一致)
限制酶 | EcoRⅠ | BamHⅠ和XhoⅠ |
原质粒 | 8.1kb | 2.7kb、5.4kb |
重组质粒 | 3.4kb、5.0kb | 未做该处理 |
3kb
3kb
。与人基因组文库中的SSB基因相比,通过①过程获得的SSB基因结构特点是 没有启动子和内含子
没有启动子和内含子
。(3)②过程目的是将重组质粒转染到处于
感受态
感受态
的大肠杆菌内,并接种于添加 卡那霉素
卡那霉素
的培养基上,收集菌落进行鉴定,将阳性菌落进一步纯化后将菌体破碎处理,筛选得到重组SSB蛋白。(4)为检测重组质粒表达情况及重组蛋白与抗体结合能力,科研人员用含纯化的重组SSB蛋白的弗氏佐剂连续三次免疫雌性小鼠,第三次免疫后第7天取小鼠血清并提取抗体并进行检测,结果表明重组SSB蛋白具有与相应抗体高度结合的能力。对小鼠进行连续三次免疫的目的是
使小鼠体内产生更多的记忆细胞和抗体
使小鼠体内产生更多的记忆细胞和抗体
。【考点】基因工程的操作过程综合.
【答案】逆转录;一段已知的SSB基因的核苷酸序列;BamHⅠ和XhoⅠ;3kb;没有启动子和内含子;感受态;卡那霉素;使小鼠体内产生更多的记忆细胞和抗体
【解答】
【点评】
声明:本试题解析著作权属菁优网所有,未经书面同意,不得复制发布。
发布:2024/4/20 14:35:0组卷:5引用:1难度:0.6
相似题
-
1.下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是( )
发布:2025/1/5 8:0:1组卷:6引用:1难度:0.7 -
2.几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分,几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内,可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括
(2)生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是
(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有
(4)提取RNA时,提取液中需添加RNA酶抑制剂,其目的是
(5)若获得的转基因植株(几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中)抗真菌病的能力没有提高,根据中心法则分析,其可能的原因是发布:2025/1/5 8:0:1组卷:2引用:2难度:0.6 -
3.下列有关基因工程的叙述,正确的是( )
发布:2024/12/31 5:0:5组卷:3引用:2难度:0.7
相关试卷