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人血清白蛋白(HSA)具有重要的医用价值。科研人员通过生物工程技术获得转HSA 基因奶牛,并通过乳腺生物反应器生产HSA,其主要技术流程如图1所示。请分析并回答下列问题:

(1)图1中为获取大量的去核卵母细胞,往往需对相应母牛使用
促性腺激素
促性腺激素
处理,使其超数排卵,收集并选取处在
减数第二次分裂中期
减数第二次分裂中期
时期的卵母细胞,通过显微操作去除细胞核。供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代 10 代以内的细胞,其原因是
(10 代以内的细胞)能保持正常的二倍体核型
(10 代以内的细胞)能保持正常的二倍体核型

(2)胚胎移植时,为使代孕母牛能处于适合的生理状态,需要用激素对其进行
同期发情
同期发情
处理。为获得更多转基因母牛,可在胚胎移植前对胚胎进行
分割
分割

(3)SRY-PCR法性别鉴定的基本程序是:提取牛胎儿成纤维细胞的DNA,经PCR 反应体系扩增SRY基因(Y 染色体上特有的性别决定基因)片段,然后对扩增产物进行检测。
①PCR反应体系中通常含有模板DNA、引物、Taq酶、
dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)
dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP)
、缓冲液等。根据SRY基因序列设计的引物长度一般为20~24个核苷酸,其不宜过短的原因主要是
防止引物随机结合(或引物的特异性差)
防止引物随机结合(或引物的特异性差)
,两种引物中G+C的含量相差不宜过大,原因主要是
G+C的含量差别过大,低温复性温度难于统一
G+C的含量差别过大,低温复性温度难于统一

②PCR 一般要经历三十多次循环,每次循环可以分为变性、
复性
复性
和延伸三步。在循环之前,常要进行一次预变性,其目的是
以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率
以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率

③细胞核内DNA的复制过程如图2 所示,其中有一条子链是先合成短的脱氧核苷酸链片段(称为冈崎片段),再形成较长的分子,而在PCR过程中无冈崎片段形成的原因是
DNA子链的延长方向只能是5'→3',细胞内是边解旋边复制,PCR中复制过程是先完全解旋再复制
DNA子链的延长方向只能是5'→3',细胞内是边解旋边复制,PCR中复制过程是先完全解旋再复制

④若扩增产物含大量SRY基因片段,则该种牛胎儿成纤维细胞
不能
不能
(填“能”或“不能”)用作技术流程中转化过程的受体细胞。

【答案】促性腺激素;减数第二次分裂中期;(10 代以内的细胞)能保持正常的二倍体核型;同期发情;分割;dNTP(dATP、dCTP、dGTP、dTTP);防止引物随机结合(或引物的特异性差);G+C的含量差别过大,低温复性温度难于统一;复性;以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率;DNA子链的延长方向只能是5'→3',细胞内是边解旋边复制,PCR中复制过程是先完全解旋再复制;不能
【解答】
【点评】
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发布:2024/6/27 10:35:59组卷:60引用:2难度:0.6
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    ,以
     
    为模板进行PCR扩增;最后与SRY特异性探针出现阴性反应者,胚胎为
     
    性。
    (3)设计试管婴儿、克隆人等都是引起人们广泛争论的问题。我国不反对治疗性克隆,即可利用人体细胞核移植等技术治疗人类疾病,在去除卵母细胞的细胞核时,可用微型吸管把位于
     
     
    之间的第一极体一并吸出。

    发布:2024/11/5 8:0:2组卷:63引用:1难度:0.8
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