人感染乳头瘤病毒（HPV）可诱发宫颈癌等恶性肿瘤，人乳头瘤病毒疫苗可以预防由HPV引起的多种宫颈癌，是世界上第一个预防癌症的疫苗。图a是HPV疫苗制备所需的L1基因片段，图b是某种质粒载体。

回答下列问题：
（1）为构建重组HPV疫苗，科研人员将L1基因插入质粒中，最好选择限制酶

BamHI、HindⅢ

BamHI、HindⅢ

进行共同切割，原因是

不会导致标记基因都被破坏/避免目的基因自身环化/避免载体自身环化/避免目的基因反向连接到载体上/BdI在质粒上的酶切位点不唯一，导致结果不可控

不会导致标记基因都被破坏/避免目的基因自身环化/避免载体自身环化/避免目的基因反向连接到载体上/BdI在质粒上的酶切位点不唯一，导致结果不可控

（答出2点即可）。
（2）图中启动子为RNA聚合酶结合位点，该处序列应根据

大肠杆菌

大肠杆菌

（填“人宫颈细胞”或“乳头瘤病毒”或“大肠杆菌”）的RNA聚合酶识别序列来设计。
（3）若将工具酶处理目的基因和质粒载体得到的混合物经过连接后转化大肠杆菌，结果大肠杆菌有的未被转化，有的含有质粒载体，有的含带有目的基因的重组质粒。如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述三种大肠杆菌中，能够正常生长的有

含有质粒载体和含有目的基因的重组质粒的大肠杆菌

含有质粒载体和含有目的基因的重组质粒的大肠杆菌

，这些大肠杆菌能正常生长的原因是

二者都含有氨苄青霉素抗性基因，可抗氨苄青霉素，在该培养基上均能生长

二者都含有氨苄青霉素抗性基因，可抗氨苄青霉素，在该培养基上均能生长

﹔若将上述筛选出来的大肠杆菌，培养在含有卡那霉素的固体培养基上，其生长情况可能是

含有质粒载体和含有目的基因的重组质粒的大肠杆菌二者都含有氨苄青霉素抗性基因，可抗氨苄青霉素，在该培养基上均能生长含有质粒载体的大肠杆菌能正常生长，而含有重组质粒的大肠杆菌不能生长

含有质粒载体和含有目的基因的重组质粒的大肠杆菌二者都含有氨苄青霉素抗性基因，可抗氨苄青霉素，在该培养基上均能生长含有质粒载体的大肠杆菌能正常生长，而含有重组质粒的大肠杆菌不能生长

、
（4）导入重组质粒的大肠杆菌表达产物衣壳蛋白L1经纯化，可被免疫系统识别，引起免疫反应。与传统灭活疫苗相比，这样的重组疫苗更安全又有效。从疫苗的组成成分分析，其主要原因是

衣壳蛋白L1无核酸成分，无繁殖能力（或侵染能力），但有抗原特性可刺激机体产生相应的抗体和记忆细胞，而传统灭活疫苗含有核酸，可能存在侵染能力

衣壳蛋白L1无核酸成分，无繁殖能力（或侵染能力），但有抗原特性可刺激机体产生相应的抗体和记忆细胞，而传统灭活疫苗含有核酸，可能存在侵染能力

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