中科院动物研究所利用CRISPR/Cas9技术，向猪的基因组内插入一个解耦联蛋白基因（UCP1）经过基因改造的猪瘦肉率高、脂肪少、抗寒能力强。如图是基因改造过程中涉及的相关限制酶及酶切位点。请回答下列问题：
（1）图中的抗生素抗性基因的作用是作为 标记标记基因，以便于筛选。为了获取重组质粒，除了使用限制酶外，还需使用 DNA连接DNA连接酶。
（2）重组质粒上应有 RNA聚合酶RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动解耦联蛋白基因（UCP1）转录，该部位称为 启动子启动子。
（3）在构建基因表达载体过程中，为避免出现质粒和目的基因自身环化，常用 BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时切割质粒和UCP1基因。
（4）获得目的基因后，常采用PCR技术扩增目的基因，在此过程中，由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA单链，只能从 3′3′端延伸DNA单链，因此需要加入引物。
（5）科研人员通过 显微注射显微注射法，将基因表达载体导入猪的受精卵中。可通过 DNA分子杂交DNA分子杂交技术，来检测UCP1基因是否已导入到猪受精卵细胞。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】标记；DNA连接；RNA聚合酶；启动子；BamHⅠ和HindⅢ；3′；显微注射；DNA分子杂交
【解答】
【点评】
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发布：2024/5/23 20:38:36组卷：24引用：4难度：0.7
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2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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