有资料表明胃癌细胞中有胃泌素相关基因的表达,而且外源性胃泌素对胃癌细胞有明显促进生长的作用。某科研人员为验证外源性胃泌素的上述作用,以及进一步研究丙谷胺对其作用的影响,进行了以下实验研究。请完善实验思路,并根据实验结果进行分析。
(要求与说明:用细胞流式测定仪测定细胞周期分布;实验结果测定的具体操作不作要求;培养过程中培养液变化忽略不计;实验条件适宜)
(1)完善实验思路:
①将X型胃癌细胞培养3天后制备细胞悬液备用。用细胞培养液配制适宜浓度的胃泌素溶液和丙谷胺溶液。
②取适量等量细胞悬液加入4组培养瓶中待继续培养,每组若干,各组处理如下。
甲组:50uL胃泌素+50uL细胞培养液50uL胃泌素+50uL细胞培养液;
乙组:50μL丙谷胺溶液+50uL细胞培养液;
丙组:50uL胃泌素+50uL丙谷胺溶液50uL胃泌素+50uL丙谷胺溶液;
丁组:100µL细胞培养液。
③将上述样品在适宜条件下进行培养。48h后取部分样品测定细胞周期分布细胞周期分布,并记录。
④72h后取剩余样品在570nm波长测定OD值72h后取剩余样品在570nm波长测定OD值,并记录。
⑤对实验数据进行统计分析,结果如下。
表:胃泌素和丙谷胺对X型胃癌细胞增殖及细胞周期的影响
组别 | 72h,570nm | 48h,各时期细胞百分比(%) | ||
OD值 | G1 | S | G2+M | |
甲 | 0.767±0.025 | 55.60 | 25.20 | 19.20 |
乙 | 0.559±0.020 | 70.10 | 20.05 | 9.85 |
丙 | 0.585±0.022 | 68.60 | 21.10 | 10.30 |
丁 | 0.561±0.026 | 70.00 | 20.00 | 10.00 |
(2)实验分析与讨论:
甲组与丁组数据比较,说明甲组的处理最可能是促进了S期细胞的
DNA复制
DNA复制
,从而促进肿瘤细胞增殖。乙、丁组数据几乎没有差异,但甲、丙组数据差异明显,可见丙谷胺具有抑制外源性胃泌素
抑制外源性胃泌素
作用。【答案】50uL胃泌素+50uL细胞培养液;50uL胃泌素+50uL丙谷胺溶液;细胞周期分布;72h后取剩余样品在570nm波长测定OD值;DNA复制;抑制外源性胃泌素
【解答】
【点评】
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