1965年中国科学家人工合成了具有生物活性的结晶牛胰岛素，摘取了人工合成蛋白质的桂冠，人胰岛素基因表达的最初产物是一条肽链构成的前胰岛素原，经图1所示的过程形成具生物活性的胰岛素。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素的两种方法：AB法是根据胰岛素AB两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段，利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素；BCA法是利用胰岛B细胞中的mRNA得到胰岛素基因，表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段。这两种方法使用同一种质粒作为载体。请分析并回答下列问题：
（1）在人体胰岛B细胞内，图1中前胰岛素原形成具生物活性的胰岛素过程中参与的细胞器有 内质网、高尔基体和线粒体内质网、高尔基体和线粒体。
（2）由于密码子具有 简并性简并性，AB法中人工合成的两种DNA片段均有多种可能的序列。 AB和BCAAB和BCA（填“AB”“BCA”或“AB和BCA”）法获取的目的基因中不含人胰岛素基因启动子。
（3）图2是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。为使目的基因与载体正确连接，在设计PCR引物时，在胰岛素基因两端可添加限制酶 XhoⅠ和MunⅠXhoⅠ和MunⅠ的识别序列。
（4）对重组表达载体进行酶切鉴定，若选择限制酶SalⅠ，假设所有对应切割位点均能切割，则溶液中最多能获得 77种大小不同的DNA片段。
（5）β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。经Ca2+处理的大肠杆菌与重组质粒混合培养一段时间后，采用 稀释涂布平板稀释涂布平板法将大肠杆菌接种到添加了 氨苄青霉素和X-gal氨苄青霉素和X-gal的培养基上筛选出 白白色的菌落即为工程菌种。
（6）科学家利用蛋白质工程技术，研制出了赖脯胰岛素，与天然胰岛素相比，其皮下注射后易吸收、起效快。获得赖脯胰岛素基因的途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】内质网、高尔基体和线粒体；简并性；AB和BCA；XhoⅠ和MunⅠ；7；稀释涂布平板；氨苄青霉素和X-gal；白；设计预期的蛋白质结构
【解答】
【点评】
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发布：2024/7/7 8:0:9组卷：1引用：2难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
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发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
