腺病毒能引起人呼吸系统不适等症状，但致死率低。研究发现该病毒可作为基因工程的载体。陈薇等科学家研发了以人5型腺病毒（Ad5）为载体的重组新冠疫苗，这是国内第一个进入临床试验阶段的新冠疫苗。腺病毒载体疫苗生产过程示意图如下：
回答下列问题：
（1）在制备人肾上皮细胞系（293细胞）时，发现培养一段时间，细胞铺满培养瓶后不再分裂，这种现象称为接触抑制接触抑制。出现此现象后，需用胰蛋白酶胰蛋白酶处理，得到细胞悬液，再进行传代传代培养，以获得更多的293细胞。
（2）新冠病毒为RNA病毒，其遗传物质不能直接拼接到质粒上，因此在制备以上疫苗时需先通过逆转录逆转录过程获得相应的DNA．构建重组腺病毒穿梭质粒，可使用双酶切法，使之产生不同不同的粘性末端以提高目的基因与质粒重组的成功率。据图可知需将重组腺病毒穿梭质粒和辅助质粒重组腺病毒穿梭质粒和辅助质粒导入293细胞，从而获得转基因腺病毒。
（3）检测转基因腺病毒携带的目的基因是否在人体细胞内表达，可检测细胞内是否含有相应的mRNAmRNA或抗原分子，若检测抗原分子可用单克隆抗体制备单克隆抗体制备技术获得特异性探针。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】接触抑制；胰蛋白酶；传代；逆转录；不同；重组腺病毒穿梭质粒和辅助质粒；mRNA；单克隆抗体制备
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：19引用：1难度：0.6
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1．下列有关基因工程技术和蛋白质工程技术叙述正确的是（ ）
发布：2025/1/5 8:0:1组卷：6引用：1难度：0.7 -
2．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6 -
3．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 5:0:5组卷：3引用：2难度：0.7
