花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如图。
据图回答下列问题：
（1）过程①所需的酶是 纤维素酶和果胶酶纤维素酶和果胶酶。
（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 叶绿体叶绿体存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
（3）原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是 保持原生质体完整性保持原生质体完整性。原生质体经过 细胞壁细胞壁再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 双亲（或花椰菜和黑芥）双亲（或花椰菜和黑芥）植株的根尖，通过 解离解离、漂洗漂洗、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
（5）采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组DNA 进行PCR 扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。如图是用该引物对双亲及再生植株1-4 进行PCR 扩增的结果。据图判断，再生植株1-4 中一定是杂种植株的有 1、2、41、2、4。
（6）对杂种植株进行 黑腐病菌黑腐病菌接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。
【考点】植物体细胞杂交技术及应用．
【答案】纤维素酶和果胶酶；叶绿体；保持原生质体完整性；细胞壁；双亲（或花椰菜和黑芥）；解离；漂洗；1、2、4；黑腐病菌
【解答】
【点评】
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发布：2024/6/27 10:35:59组卷：508引用：23难度：0.5
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