R-7是家蚕体内的一种小分子非编码RNA，可与某些mRNA一端的一段非编码序列（3'-MTR）结合，进而影响基因的表达。为研究R-7是否影响家蚕基因B（调控家蚕眼睛发育）的表达，科研人员将基因B中对应3'-MTR的DNA片段与荧光素酶基因（R-7不影响荧光素酶基因的表达）重组，如图1所示。将该重组载体导入家蚕胚胎细胞并检测其表达情况，结果如图2所示。回答下列问题：
（1）若图1表示一个完整的基因表达载体，则其中至少缺失了 目的基因（或3'-MTR的DNA片段和复制原点）目的基因（或3'-MTR的DNA片段和复制原点），其中的荧光素酶基因相当于 标记基因标记基因。
（2）要想短时间内获得大量目的基因，需要用到的技术是 PCR扩增技术PCR扩增技术，该技术利用了 DNA热变性DNA热变性原理，通过调节温度来控制DNA双链的解聚与结合。
（3）图1中构建基因表达载体时应将目的基因插入到位点 22，原因是 目的基因应插入启动子与终止子之间，且不能破坏荧光素酶基因目的基因应插入启动子与终止子之间，且不能破坏荧光素酶基因。
（4）科研人员从图2所示的实验组和对照组细胞中提取蛋白质，经处理检测后获得相对荧光值（在适宜条件下，荧光素酶可催化荧光素发生氧化反应并发出荧光）。实验组为将重组载体导入含R-7的家蚕胚胎细胞中，对照组1为将重组载体导入不含（或去除）R-7的家蚕胚胎细胞中，则对照组2应该为 将含有荧光素酶基因但不含对应3'-MTR的DNA片段的表达载体导入含R-7的家蚕胚胎细胞中将含有荧光素酶基因但不含对应3'-MTR的DNA片段的表达载体导入含R-7的家蚕胚胎细胞中。由图2结果推知R-7抑制连接了3′-MTR的DNA片段的基因B表达的 翻译翻译过程。
【考点】基因工程的操作过程综合．
【答案】目的基因（或3'-MTR的DNA片段和复制原点）；标记基因；PCR扩增技术；DNA热变性；2；目的基因应插入启动子与终止子之间，且不能破坏荧光素酶基因；将含有荧光素酶基因但不含对应3'-MTR的DNA片段的表达载体导入含R-7的家蚕胚胎细胞中；翻译
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：8引用：3难度：0.5
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3．几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。回答下列问题：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
（2）生物体细胞内的DNA复制开始时，解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有和，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是。当几丁质酶基因和质粒载体连接时，DNA连接酶催化形成的化学键是。
（4）提取RNA时，提取液中需添加RNA酶抑制剂，其目的是。
（5）若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：2引用：2难度：0.6
