2020年诺贝尔化学奖授予了两位开发出CRISPR/Cas9基因编辑技术的科学家，该技术在实体瘤研究中得到广泛应用。
（1）Cas9是一种来自细菌的核酸内切酶，其由相关基因指导在核糖体核糖体上合成，它与sgRNA构成的复合体能与DNA分子特定碱基序列结合，如图1所示，据图1分析，作用原理是sgRNA能与DNA单链进行碱基互补配对碱基互补配对，Cas9能在NGGPAM序列（几乎存在于所有基因中）上游切断DNA双链的磷酸二酯磷酸二酯键。
（2）结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，研究发现APC基因发生突变引起的结肠和直肠腺瘤性息肉与结直肠癌密切相关。将Cas9Cas9基因及靶向小鼠APC基因的16号外显子的双链sgRNA拼接后形成目的基因目的基因与慢病毒载体结合，导入小鼠结肠细胞，获得APC基因缺失的结肠细胞，通过黏膜注射，将APC基因缺失结肠细胞原位移植入免疫缺陷小鼠，生成腺瘤，获得结直肠癌小鼠模型，请写出该模型的一种应用研究药物对结直肠癌小鼠的治疗效果，研究结直肠癌发病机理研究药物对结直肠癌小鼠的治疗效果，研究结直肠癌发病机理。
（3）CRISPR/Cas9技术还可用于结直肠癌相关基因功能的研究。研究人员通过CRISPR/Cas9技术在人结肠癌细胞HRT18中敲除产促红细胞生成素人干细胞A1受体基因（EPHA1基因），进行细胞划痕实验。
补充图中步骤①空质粒空质粒，②胰蛋白酶或胶原蛋白酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶，③贴壁贴壁。由图可知，与另外两组相比，48h后c组细胞划痕的宽度较小小，说明EPHA1基因可抑制人结肠癌细胞扩散转移EPHA1基因可抑制人结肠癌细胞扩散转移。
（4）请写出CRISPR/Cas9基因编辑技术其他可能的一项应用基因治疗、动植物品种改良基因治疗、动植物品种改良。
【考点】动物细胞培养的条件与过程．
【答案】核糖体；碱基互补配对；磷酸二酯；Cas9；目的基因；研究药物对结直肠癌小鼠的治疗效果，研究结直肠癌发病机理；空质粒；胰蛋白酶或胶原蛋白酶；贴壁；小；EPHA1基因可抑制人结肠癌细胞扩散转移；基因治疗、动植物品种改良
【解答】
【点评】
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发布：2024/4/20 14:35:0组卷：26引用：1难度：0.7
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1．动物细胞培养和植物组织培养是细胞工程的基本技术，下列关于这两项技术的叙述，正确的是（ ）
发布：2024/12/31 1:30:1组卷：29引用：2难度：0.7 -
2．回答与基因工程、动物克隆和胚胎工程有关的问题：
（1）几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化几丁质水解。通过基因工程将几丁质酶基因转入植物体内，可增强其抗真菌病的能力。在进行基因工程操作时，可以从植物体中提取几丁质酶的mRNA，以mRNA为材料可以获得cDNA，其原理是。若获得的转基因植株（几丁质酶基因已经整合到植物的基因组中）抗真菌病的能力没有提高，根据中心法则分析，其可能的原因是。
（2）为了提高动物成纤维细胞克隆形成率，可以选择适宜的培养基、添加牛血清、以支持生长等措施。当第一个卡氏瓶中的细胞浓度不再增加时，若要细胞继续增殖，可采用的方法是。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO2浓度，CO2的作用是。
（3）下列关于胚胎工程的叙述，错误的是
A．在动物的饲料中添加一定量的促性腺激素促使超数排卵
B．若在囊胚期进行胚胎分割，内细胞团均等分割，滋养成则不必
C．可以从雌性动物体内卵泡处吸取卵泡液，取出卵母细胞进一步培养成熟
D．胚胎成纤维细胞可以用于胚胎干细胞的培养，因为其能分泌抑制细胞分化的物质。发布：2025/1/5 8:0:1组卷：4引用：1难度：0.7 -
3．据国际糖尿病联盟最新数据，2021年全球约5.37亿成人患有糖尿病，670万成人因糖尿病或其并发症死亡。如图是研究人员提出的治疗方案，请回答下列问题：
（1）从患者体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为。一般来说，动物细胞培养需要的条件有（少答出两点）。
（2）利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是。目前临床用的胰岛素生效较慢，科学家将胰岛素β链的第28和29个氨基酸调换顺序，成功获得了速效胰岛素。生产速效胰岛素，需要对进行定向改造。
A.胰岛素
B.胰岛素mRNA
C.胰岛素基因
D.胰岛
（3）欲检测胰岛类似细胞是否具有胰岛B细胞的正常生理功能，可设计如下实验：将等量的胰岛类似细胞与正常胰岛B细胞分别加入两组相等浓度的培养液中，适宜且相同条件下进行培养，一段时间后分别检测两组培养液中。
（4）该治疗糖尿病的方法与异体移植相比，突出的优点是。发布：2024/12/31 2:30:2组卷：35引用：2难度：0.6
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