图1为Ti质粒酶切图谱。图2为含Bt基因（杀虫毒蛋白基因）的外源DNA片段的限制酶酶切图谱。图3表示相关限制酶的识别序列及切割位点。现欲通过农杆菌转化法培育转Bt基因抗虫棉。回答下列问题：

（1）除四环素抗性基因和Bt基因外，作为表达载体，该质粒至少还应该具有

启动子、终止子（或复制原点）

启动子、终止子（或复制原点）

等调控元件；PstⅠ等的识别序列及切割位点应位于

T-DNA

T-DNA

片段内，以确保Bt基因随Ti质粒进入棉花细胞后能插入到棉花细胞中的染色体DNA上。
（2）为保证Bt基因与Ti质粒的正常连接，应选用

PstⅠ

PstⅠ

酶和MseⅠ酶切割外源DNA，并将Ti质粒上的序列“GAATTC”改造为

GAATTAATTC

GAATTAATTC

。
（3）转Bt基因的棉花细胞经过

脱分化、再分化

脱分化、再分化

过程可以培育成转基因棉花幼苗；利用抗原—抗体反应等原理，可以检测转基因抗虫棉幼叶中的Bt毒蛋白及其含量，以此来检测

Bt基因是否表达及表达程度

Bt基因是否表达及表达程度

。
（4）我国发放了6种转基因植物进口安全证书，但进口的基本上是转基因棉花的纤维而不是转基因玉米等粮食产品，从转基因技术安全性的角度分析，原因是

转基因粮食产品用于加工成食品，可能影响人体健康，而转基因棉花的纤维不是用于加工成食品

转基因粮食产品用于加工成食品，可能影响人体健康，而转基因棉花的纤维不是用于加工成食品

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